 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1511 | 回復(fù): 5 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
我是一只老年新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
為何小樣誘導(dǎo)有條帶，大量誘導(dǎo)后目的條帶幾乎沒了？ 已有1人參與
|
|
|
如圖1是預(yù)誘導(dǎo)時(shí)的圖，使用的載體是PET-32a，目的蛋白大小約66.2kDa。小樣預(yù)誘導(dǎo)時(shí)，由于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的小型超聲波破碎儀壞了，跑的膠是全菌（未破碎），條帶顯示有我的目的條帶，小樣誘導(dǎo)的條件是：先搖菌2.5h-3h后，加IPTG 16° 誘導(dǎo)20h。 然后再大量搖菌，每瓶300ml，IPTG濃度取0.3M，搖菌4h后，加IPTG 16°誘導(dǎo)20h后用大型低溫高壓破碎儀破碎，破碎后發(fā)現(xiàn)有白色的乳狀物體？？（如圖2）然后離心取上清液過鎳柱，用不同濃度咪唑洗脫。 可是跑膠發(fā)現(xiàn)我的目的蛋白濃度很低，甚至不如雜蛋白濃度。尤其是第一個(gè)孔那里的上清液中的目的蛋白濃度很低，（如圖3）求助大神，為何小樣誘導(dǎo)時(shí)條帶很亮，而大量誘導(dǎo)反而濃度低了？是我大量誘導(dǎo)的條件需要改變還是蛋白在沉淀中表達(dá)？如果在沉淀中表達(dá)的話，如何才能純化出來呢？謝謝��！ 1.蛋白小樣預(yù)誘導(dǎo)（沒破碎，跑的全菌） 2.蛋白大量破碎后有白色乳狀沉淀 3.大量誘導(dǎo)后過柱圖，上清液中目的蛋白量少 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有136人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
xhw2033696 
銀蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 265.6
- 帖子: 43
- 在線: 17小時(shí)
- 蟲號(hào): 6694230
- 注冊(cè): 2017-06-05
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2017-06-16 10:35:40
xhw2033696
銀蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 265.6
- 帖子: 43
- 在線: 17小時(shí)
- 蟲號(hào): 6694230
- 注冊(cè): 2017-06-05
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
2樓2017-06-16 10:14:15
我是一只老年
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 13.7
- 帖子: 14
- 在線: 3.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 3209260
- 注冊(cè): 2014-05-15
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2017-06-16 10:31:14
我是一只老年
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 13.7
- 帖子: 14
- 在線: 3.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 3209260
- 注冊(cè): 2014-05-15
- 專業(yè): 生物化學(xué)
5樓2017-06-16 17:21:35
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +11 | 陽陽哇塞 2026-03-27 | 12/600 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑 +4 | 愛吃番茄的旭 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +4 | 舊吢 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 26申博 +3 | 加油沖�。� 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +10 | 金恩貝 2026-03-21 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +5 | Pigcasso 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 314求調(diào)劑 +3 | 溪云珂 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +7 | 蛋黃咸肉粽 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械學(xué)碩310分，數(shù)一英一，一志愿211本科雙非找調(diào)劑信息 +3 | @357 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 315分求調(diào)劑 +5 | 26考研上岸版26 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料專碩 335 分求調(diào)劑 +4 | 拒絕冷暴力 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +15 | Zhao anqi 2026-03-22 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求導(dǎo)師收 +7 | 天天好運(yùn)來上岸?/a> 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿武漢理工大學(xué)材料工程（085601） +5 | WW.' 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 277分求調(diào)劑，跨調(diào)材料 +3 | 考研調(diào)劑lxh 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 335求調(diào)劑 +4 | yuyu宇 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑(一志愿湖南大學(xué)070300) +5 | 番茄頭--- 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 石河子大學(xué)（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +6 | shansx 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 要好好無聊 2026-03-21 | 4/200 |
|