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[交流]
克隆基因全長引物設(shè)計(jì)問題 已有9人參與
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已知一序列全長，如何根據(jù)此序列設(shè)計(jì)引物克隆出全長，我是新手，麻煩各位詳細(xì)介紹一下設(shè)計(jì)全長引物的步驟，最近實(shí)驗(yàn)急需，非常感謝�。�！ 我以前克隆過片段，沒有做過全長，引物設(shè)計(jì)的一些基本原則都已了解，但是設(shè)計(jì)全長引物一點(diǎn)都不懂，勞煩各位，謝謝！ |
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zhuifeng7000
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1、從你的全長基因的正義鏈直接數(shù)出16-20個(gè)堿基（從ATG開始），然后在它的5‘端加上游酶切位點(diǎn)，如果需要的話加上保護(hù)堿基。 2、從你的全長基因的反義鏈從5’-3‘端直接數(shù)出16-20個(gè)堿基，后在它的5‘端加上游酶切位點(diǎn)，如果需要的話加上保護(hù)堿基。 這樣引物就設(shè)計(jì)好了。 注意：上下游的酶切位點(diǎn)不要設(shè)計(jì)反了。 |
7樓2009-11-06 00:09:19
xiangao
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3樓2009-11-04 16:22:43
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4樓2009-11-04 17:02:39
5樓2009-11-05 15:31:25
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