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[交流]
【交流】液相色譜柱柱效的提高和測算 已有2人參與
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一、提高液相色譜柱柱效的方法 我們知道色譜峰的擴(kuò)寬與移動相在熱力學(xué)的分配過程、移動相和固定相中傳質(zhì)阻力所引起的不平衡有關(guān),譜峰擴(kuò)寬(非平衡)的程度是流速對傳質(zhì)速率的直接函數(shù)。要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。 (1)降低移動相的流速,但會使分析時間延長。 (2)減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負(fù)載量也隨之減小。 (3)減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。 (4)選用低粘度的移動相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。 (5)適當(dāng)提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。 (6)盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。 從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相聯(lián)系和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實踐,才能找到最佳的工作條件。 二、對柱效值進(jìn)行跟蹤測算應(yīng)注意的問題 我們也應(yīng)記住柱效值即塔板數(shù)只表示該色譜柱裝填的好壞,只用柱效值并不足以預(yù)測在所有條件下的柱性能,因為在這些條件下,柱性能主要表示動力學(xué)過程對色譜柱譜帶加寬的量。其他一些影響峰寬的因素,如柱外效應(yīng)和熱力學(xué)因素(通常表現(xiàn)為峰拖尾),在理想情況下對于確定柱效值并不起重要作用。因為任何一個柱性能的定義都必然與用此色譜柱所做的分離相聯(lián)系,所以依據(jù)一個單獨的數(shù)字來評定柱性能是不切實際的。對大多數(shù)色譜工作者來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。 不管用什么特定的測試方法,都會有幾個參數(shù)影響柱效的測定。這些參數(shù)包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測定塔板數(shù)所用的溶質(zhì),溫度,柱長,填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。盡管大多數(shù)柱效測算沒有設(shè)法消除液相色譜儀器系統(tǒng)各部件對表觀峰寬的影響,但只要儀器是正常使用的,這些影響是次要的。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。 三、幾種測量和計算柱效值的方法 因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線來計算理論塔板數(shù)。因此計算柱效(以理論塔板數(shù)n為單位)的公式習(xí)慣上定義為: 式中tR為色譜峰的保留時間; σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰高(從測峰寬的基線量起)有關(guān)的常數(shù), ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側(cè)拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。圖1所示為正態(tài)峰輪廓所測量峰寬處的峰高與7種可能的測定n的方法所對應(yīng)的常數(shù)a值之間的關(guān)系。 資料來源：www.yiqi120.com |
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3樓2011-08-30 11:53:31
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