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[交流]
【求助/交流】關(guān)于酵母X33電轉(zhuǎn)的問(wèn)題 已有5人參與
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最近做了幾次電轉(zhuǎn)酵母,都不成功。第一次是才開(kāi)始做,第一次做的感受態(tài)好像污染了,電轉(zhuǎn)一天后就長(zhǎng)出類似于細(xì)菌的東東,接著做了一次感受態(tài),電轉(zhuǎn)一天后長(zhǎng)了一顆類似酵母的菌,檢測(cè)為陰性(按常規(guī)方法跑的菌落PCR,有很淡的目的條帶,點(diǎn)樣孔附近還有很亮的條帶,估計(jì)是陰性,不知道這步是不是有問(wèn)題)。前兩次的感受態(tài)都好像培養(yǎng)過(guò)了一點(diǎn),第三次算是正常的,再按前兩次的條件轉(zhuǎn),3天了什么都沒(méi)長(zhǎng)。我的電轉(zhuǎn)條件是2000v,3~5ms,80ul感受態(tài)加了10ul線性化后的質(zhì)粒,郁悶中,請(qǐng)教實(shí)驗(yàn)室同門的同時(shí)也請(qǐng)蟲友指教一下,謝謝! [ Last edited by 王雨云 on 2010-4-29 at 09:27 ] |
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