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seatop銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助】水解氨基酸 檢測(cè)不出來(lái)
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反相色譜檢測(cè)水解氨基酸的時(shí)候不能出峰 想請(qǐng)教各位高手： 1氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品的出峰完全正常，沒(méi)有一點(diǎn)問(wèn)題; 2標(biāo)準(zhǔn)品和樣品進(jìn)樣都是5ul、 雖有我將樣品進(jìn)樣量提高到20ul，仍然一點(diǎn)也不能出峰; 我實(shí)用的酸水解方法是： 準(zhǔn)確稱取一定量樣品，使樣品氨基酸總量在50～75mg范圍內(nèi), 置于20-30mL安瓿瓶中，加入10mL含0.1%苯酚的6mol/L鹽酸, 振搖使樣品溶解或使樣品均勻分散于溶液中，將安瓿瓶置-20℃冰箱中冷凍3～5min，充氮后用噴燈熔封，然后置110±1℃烘箱中水解24小時(shí), 取出冷卻，打開(kāi)安瓿瓶，將水解液全部轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶?jī)?nèi)，用超純水或去離子水定容至刻度，混勻, 供衍生使用。 想不明白為什么會(huì)一點(diǎn)也不能出峰。 水解的時(shí)候充氮和密封都是沒(méi)有問(wèn)題的。 如果密封不好是不是會(huì)出現(xiàn)這種情況? |
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