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plantst5928銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】低GC含量的模板設(shè)計引物 已有6人參與
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| 本人最近要做一個基因的互補,用CDNA為模板區(qū)擴(kuò)增該基因的CDS,但是設(shè)計的引物一直擴(kuò)不出來,我不停的更換引物,加大長度,提高TM值等,但是沒有收到有效的結(jié)果,擴(kuò)增的特意性很差。后來我發(fā)現(xiàn)我的模板的GC含量比較低,不到30%。設(shè)計引物的TM值也不高,我嘗試在酶切微點的額保護(hù)堿基處多加幾個GC,也不行。對于GC含量低的模板,大家有什么好方法得到比較特異的擴(kuò)增嗎? |
銅蟲 (小有名氣)
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