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plantst5928銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】低GC含量的模板設(shè)計引物 已有6人參與
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| 本人最近要做一個基因的互補，用CDNA為模板區(qū)擴增該基因的CDS，但是設(shè)計的引物一直擴不出來，我不停的更換引物，加大長度，提高TM值等，但是沒有收到有效的結(jié)果，擴增的特意性很差。后來我發(fā)現(xiàn)我的模板的GC含量比較低，不到30%。設(shè)計引物的TM值也不高，我嘗試在酶切微點的額保護堿基處多加幾個GC，也不行。對于GC含量低的模板，大家有什么好方法得到比較特異的擴增嗎？ |
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plantst5928
銅蟲 (小有名氣)
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4樓2010-05-05 14:36:58
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5樓2010-05-05 14:53:07
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