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wangxueqin金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】怎么就是p不出目的片段啊 已有14人參與
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向高手請教： 目前在擴(kuò)一個(gè)片段，已經(jīng)有人用這對引物擴(kuò)過，都得到的是800bp的片段，我第一次擴(kuò)的時(shí)候直接用56的退火溫度（查文獻(xiàn)說這個(gè)片段GC含量較高，需較高退火溫度，引物不是我們自己設(shè)計(jì)的，是前人文章中得來的），結(jié)果很好，整齊且亮的主帶，沒有任何雜帶，雖然大小不對， 我還是將結(jié)果送去測序，可是結(jié)果回來根本不是我們要擴(kuò)的片段中的，連一部分也不是。昨天我又用48的退火溫度做了個(gè)，可是依舊是只有200bp附近有主帶，在800bp附件連雜帶也是非常弱的啊。 請問下高手有何方法，可以把800bp的帶給擴(kuò)出來啊，因?yàn)榍叭俗鲞^實(shí)驗(yàn)證實(shí)是可以擴(kuò)出來的。多謝多謝。 有圖  |
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老夏853
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3樓2010-05-26 09:49:20
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5樓2010-05-26 10:02:43
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