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夢(mèng)想起飛銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】菌落PCR擴(kuò)出來(lái)的片段不是目的片段，咋辦�。�？？？ 已有6人參與
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| 今天兩次菌落PCR，擴(kuò)出來(lái)的片段都不是目的片段。最初P的是菌的16S，用的是通用引物27F和1492R，擴(kuò)出來(lái)1500bp左右的16S片段，然后將PCR產(chǎn)物切膠回收純化，并且已檢測(cè)了回收產(chǎn)物，是1500左右。然后做連接，連接到pMD19—T載體上，轉(zhuǎn)化JM109感受態(tài)，次日，平板上長(zhǎng)出菌落，白斑居多，藍(lán)斑數(shù)個(gè)，挑取白斑做菌落PCR，引物用M13，電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物，條帶居然在500bP處！��！嚇我一跳！我做了兩次了，兩次一共挑了19個(gè)白斑了，擴(kuò)出來(lái)都是500bp的。怎么回事啊這是？？？？？請(qǐng)大俠們解釋一下。感激涕零！�。�！ |
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waiwaidou_1983
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夢(mèng)想起飛
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