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[交流]
【求助/交流】菌落PCR擴出來的片段不是目的片段,咋辦???? 已有6人參與
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| 今天兩次菌落PCR,擴出來的片段都不是目的片段。最初P的是菌的16S,用的是通用引物27F和1492R,擴出來1500bp左右的16S片段,然后將PCR產物切膠回收純化,并且已檢測了回收產物,是1500左右。然后做連接,連接到pMD19—T載體上,轉化JM109感受態(tài),次日,平板上長出菌落,白斑居多,藍斑數(shù)個,挑取白斑做菌落PCR,引物用M13,電泳檢測PCR產物,條帶居然在500bP處。。樜乙惶!我做了兩次了,兩次一共挑了19個白斑了,擴出來都是500bp的。怎么回事啊這是?????請大俠們解釋一下。感激涕零。。! |
銅蟲 (小有名氣)
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木蟲 (正式寫手)
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