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[交流]
【求助/交流】菌落PCR擴(kuò)出來的片段不是目的片段，咋辦��？？？？ 已有6人參與
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| 今天兩次菌落PCR，擴(kuò)出來的片段都不是目的片段。最初P的是菌的16S，用的是通用引物27F和1492R，擴(kuò)出來1500bp左右的16S片段，然后將PCR產(chǎn)物切膠回收純化，并且已檢測了回收產(chǎn)物，是1500左右。然后做連接，連接到pMD19—T載體上，轉(zhuǎn)化JM109感受態(tài)，次日，平板上長出菌落，白斑居多，藍(lán)斑數(shù)個(gè)，挑取白斑做菌落PCR，引物用M13，電泳檢測PCR產(chǎn)物，條帶居然在500bP處�。�！嚇我一跳！我做了兩次了，兩次一共挑了19個(gè)白斑了，擴(kuò)出來都是500bp的。怎么回事啊這是？？？？？請大俠們解釋一下。感激涕零�。。�！ |
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waiwaidou_1983
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2樓2010-12-14 21:15:54
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6樓2010-12-14 22:20:01
7樓2010-12-15 20:56:59
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Arrennew
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9樓2010-12-15 22:37:32
10樓2010-12-17 10:13:37
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