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yanhong2029
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[交流]
【求助/交流】枯草中表達外源基因，有蛋白，但是沒有酶活，是什么原因？ 已有3人參與
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來源于大腸桿菌一種變形菌（革蘭氏陽性細菌）的外源目的基因，將其克隆至大腸桿菌中表達，能夠表達出活性。 然后將其克隆至枯草芽孢桿菌中表達，采用的是枯草編碼30S核糖蛋白rpsD基因的啟動子，該啟動子是一組成型強啟動子。該表達出來的蛋白酶，在作用于底物時需要還原型輔酶I：NADH。 SDS-PAGE顯示有蛋白，但是測定酶活性時一直沒有結(jié)果？ 十分苦惱，未知是什么原因？ 是形成包涵體呢？ 還是該蛋白在該宿主中雖然表達，但是表達出來的就是沒有活性的蛋白？ 還是輔酶的原因？ 需要如何確定？ 還請各位朋友能夠幫忙解決！ 著急畢業(yè)呢！ 先謝謝各位了！ |
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