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liby銅蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】SDS-PAGE跑不出帶 已有22人參與
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| 我的目的蛋白大概是43KDa,我用了10%的分離膠，用考馬斯亮藍(lán)染色一個(gè)半小時(shí)，脫色一晚上，結(jié)果沒帶，marker都沒出來(lái)，樣品是我測(cè)過有酶活的發(fā)酵液。這是什么原因，請(qǐng)教各位 |
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冼亮淀粉酶
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 - MolEPI: 46
- 應(yīng)助: 257 (大學(xué)生)
- 貴賓: 0.272
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- 散金: 1704
- 紅花: 121
- 帖子: 6586
- 在線: 2777.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 856414
- 注冊(cè): 2009-09-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
- 管轄: 微生物
13樓2010-07-05 18:22:59
冼亮淀粉酶
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+2):歡迎多多交流~希望對(duì)樓主有所幫助~· 2010-07-12 13:13:27
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+2):歡迎多多交流~希望對(duì)樓主有所幫助~· 2010-07-12 13:13:27
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固定液里的甲醇如果加到染色液里就不用單獨(dú)固定了。 染色液如果是反復(fù)用的，G250太稀了即使是染再久也不會(huì)看的到條帶。 脫色液不換的話，即使是沒有蛋白質(zhì)的地方也還是藍(lán)色的，脫色過夜也還是一片藍(lán)色。 mark可能是別人配得不好，濃度不對(duì)。酶液即使是有酶活力，蛋白質(zhì)不夠多也是看不出條帶的。 43kd那么大，即使溴酚蘭剛好跑出去也還是不會(huì)跑出去的，除非帶電荷非常大，對(duì)泳速的影響比分子量還大。這個(gè)要看蛋白質(zhì)的PI值和電泳液的pH值。 |
14樓2010-07-05 18:29:02
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