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黑色月光銅蟲 (小有名氣)
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【求助】{蛋白質(zhì)測定相關(guān)問題 已有9人參與
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我現(xiàn)在在做酶解蝦殼粉提取蛋白的實驗,其酶解液將作為風(fēng)味料反應(yīng)的基液。 我先前一直用凱氏定氮法測定酶解液中蛋白含量,但結(jié)果發(fā)現(xiàn)加入酶和沒加入酶的含氮量基本相同,我已排除加酶量、酶解時間以及所加入的酶的問題,這到底是怎么回事呢?是不是測定方法本身的問題?求高手解釋,謝謝! PS:也有師姐跟我說會不會是我的蝦殼粉(蝦頭、蝦殼、蝦腳粉碎而成)因為前處理是低溫(50~60度)烘干的,蝦本身含有的酶沒有被滅活的緣故?墒且粋老師跟我說,烘5~6小時這么長時間,酶早就滅活了。 把昨天的補充一下: 今天,我讓師姐用福林酚法測了一下,之前我做的處理是:5g蝦粉:100ml緩沖液,分三組,第一組不加酶;第二組加復(fù)合蛋白酶,第三組加風(fēng)味蛋白酶。蛋白酶添加量均為原料重量的0.2%,50度水解3小時,100度滅酶10min,離心取上清,均定容至100ml。師姐用我的料液稀釋30倍后測得的吸光度是:第一組 0.513;第二組 0.525; 第三組 0.544 師姐說后面兩個值與她之前做的差不多,但沒有加酶的第一組數(shù)值卻比她做過的高很多。她所用的蝦粉前處理用過105度烘干,我的只是低溫烘干,這么看來難道是我的原料前處理的關(guān)系嗎? [ Last edited by 黑色月光 on 2010-7-15 at 23:02 ] |
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