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黑色月光銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助】{蛋白質(zhì)測(cè)定相關(guān)問(wèn)題 已有9人參與
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我現(xiàn)在在做酶解蝦殼粉提取蛋白的實(shí)驗(yàn)，其酶解液將作為風(fēng)味料反應(yīng)的基液。 我先前一直用凱氏定氮法測(cè)定酶解液中蛋白含量，但結(jié)果發(fā)現(xiàn)加入酶和沒(méi)加入酶的含氮量基本相同，我已排除加酶量、酶解時(shí)間以及所加入的酶的問(wèn)題，這到底是怎么回事呢？是不是測(cè)定方法本身的問(wèn)題？求高手解釋，謝謝！ PS：也有師姐跟我說(shuō)會(huì)不會(huì)是我的蝦殼粉（蝦頭、蝦殼、蝦腳粉碎而成）因?yàn)榍疤幚硎堑蜏兀?0~60度）烘干的，蝦本身含有的酶沒(méi)有被滅活的緣故�？墒且粋�(gè)老師跟我說(shuō)，烘5~6小時(shí)這么長(zhǎng)時(shí)間，酶早就滅活了。 把昨天的補(bǔ)充一下： 今天，我讓師姐用福林酚法測(cè)了一下，之前我做的處理是：5g蝦粉：100ml緩沖液，分三組，第一組不加酶；第二組加復(fù)合蛋白酶，第三組加風(fēng)味蛋白酶。蛋白酶添加量均為原料重量的0.2%，50度水解3小時(shí)，100度滅酶10min，離心取上清，均定容至100ml。師姐用我的料液稀釋30倍后測(cè)得的吸光度是：第一組 0.513；第二組 0.525； 第三組 0.544 師姐說(shuō)后面兩個(gè)值與她之前做的差不多，但沒(méi)有加酶的第一組數(shù)值卻比她做過(guò)的高很多。她所用的蝦粉前處理用過(guò)105度烘干，我的只是低溫烘干，這么看來(lái)難道是我的原料前處理的關(guān)系嗎？ [ Last edited by 黑色月光 on 2010-7-15 at 23:02 ] |
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3樓2010-07-15 11:25:12
201103yxw
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4樓2010-07-15 17:35:55
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5樓2010-07-15 22:40:18
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