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維納斯的騎士金蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】蛋白酶去信號(hào)肽可以正常表達(dá)嗎？和表達(dá)載體有關(guān)嗎？ 已有3人參與
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| 我最近在做木瓜蛋白酶的克隆表達(dá)，去除自身信號(hào)肽的26個(gè)氨基酸（78個(gè)堿基）后，設(shè)計(jì)引物克隆后面部分的堿基序列，用的表達(dá)載體是pet20b和一個(gè)本實(shí)驗(yàn)室的熱激載體，這兩個(gè)載體上都有信號(hào)肽序列，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)表達(dá)后發(fā)現(xiàn)pet20b的可以表達(dá)目的蛋白，但活性較小，熱激載體的無(wú)目的蛋白條帶，所以現(xiàn)在就在考慮是否蛋白酶去除了自身信號(hào)肽后表達(dá)活性受較大影響，和表達(dá)載體會(huì)有關(guān)系嗎，或者該植物來(lái)源的木瓜蛋白酶需要在原核中改成其可以識(shí)別的優(yōu)勢(shì)密碼子表達(dá)才可，請(qǐng)教這里的高手給些建議和意見(jiàn)，謝謝了！ |
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lxj341401
至尊木蟲(chóng) (著名寫手)
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2樓2010-07-20 08:28:06
dianaofyezi
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3樓2010-07-20 10:45:43
維納斯的騎士
金蟲(chóng) (小有名氣)
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4樓2010-07-21 00:58:16
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