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hufen-0328新蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助】關(guān)于液相測氨基酸的問題 已有6人參與
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用的是Venusil-AA氨基酸分析法測定魚肉中的氨基酸 標樣出的色譜圖很好 樣品出峰很少而且很小，加大濃度后還是不行 懷疑是樣品水解過程中出了問題 我的水解方法：0.2g左右的魚干粉加入5mL6mol/L的鹽酸，抽真空后封口，110度 水解24h 想請問做過的朋友，我的水解過程有沒有問題?再有就是水解后是什么顏色的?我的呈棕色，發(fā)現(xiàn)我處理的標品在放置一天后，顏色由無色變成了黃色，是不是我的樣品中的氨基酸在水解的過程中已被氧化了？ |
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pkming
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hufen-0328(金幣+3):專業(yè)，熱心，非常感謝 2010-08-09 15:42:54
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我用的不是方法包，直接用PITC衍生，普通的C18色譜柱。一般衍生是比較穩(wěn)定的，PITC衍生產(chǎn)物比其他衍生又穩(wěn)定些，但是建議現(xiàn)做先衍生（一般都要求這樣），不要超過1d，否則衍生物不穩(wěn)定。 問題我懷疑還是出現(xiàn)在水解這一塊。建議注意一下幾個方面 1、水解過程中注意充氮氣，快速封口，做好保護 2、用混合氨基酸做水解對比，來驗證水解對氨基酸的影響， 3、你是直接用水解樣衍生的，這樣不妥。應(yīng)該濃縮一下，還有樣品的PH對后續(xù)衍生會影響。（建議對水解后的樣品做相應(yīng)的處理，我認為這是關(guān)鍵） |
4樓2010-08-09 15:16:35
pkming
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5樓2010-08-09 15:41:52
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