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0744904木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助】氨基酸制劑 高效液相色譜法 有關(guān)物質(zhì)測(cè)定
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| 請(qǐng)教各位蟲(chóng)友們,如果用高效液相色譜法做一種氨基酸制劑的含量測(cè)定和有關(guān)物質(zhì)測(cè)定,兩者對(duì)色譜條件的要求可以一樣嗎?一般氨基酸制劑的有關(guān)物質(zhì)測(cè)定如用高效液相色譜法該如何著手。空(qǐng)各位高手指教! |
生工檢測(cè)理論與實(shí)務(wù) |
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銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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測(cè)定氨基酸的方法很多,液相DNFB衍生,OPA衍生,氨基酸分析儀等等。但是如果用同樣的方法采用普通的面積歸一化法顯然是不科學(xué)的,且不說(shuō)氨基酸的吸收波長(zhǎng)和相應(yīng)值本來(lái)就差別很大, 但是能否保證所有雜質(zhì)是否能與這么多氨基酸分離開(kāi)都成問(wèn)題。 氨基酸一直以來(lái)都不要求研究有關(guān)物質(zhì),近來(lái)有關(guān)部門(mén)要求研究了,而原研是不要求的,沒(méi)有相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)可參考,甚至于定哪些雜質(zhì)都還未知,這個(gè)有關(guān)部門(mén)自己也不知道,或許是想把這個(gè)球踢給企業(yè),然后再根據(jù)企業(yè)報(bào)上來(lái)的資料作參考來(lái)進(jìn)行指定吧。 思路一(詳細(xì)研究):先確定哪些氨基酸是不穩(wěn)定的,然后研究這些不穩(wěn)定氨基酸的雜質(zhì)。 思路二(粗略研究):查閱文獻(xiàn)確定現(xiàn)已有報(bào)道的氨基酸的雜質(zhì),然后重點(diǎn)研究這些雜質(zhì)。 |
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方法可以不用一樣,通常含量方法可以簡(jiǎn)單一些,只要求主峰與各個(gè)雜質(zhì)分離開(kāi)即可,至于其他雜質(zhì)間分不分的開(kāi)不用管;有關(guān)物質(zhì)就要麻煩一些了,他要求各個(gè)雜質(zhì)間以及雜質(zhì)與主峰間要完全達(dá)到基線分離。 在具體說(shuō)說(shuō)氨基酸吧,之前做個(gè)兩個(gè)氨基酸的項(xiàng)目,衍生化法和氨基柱直接分許法均試過(guò),建議有關(guān)物質(zhì)不要采用衍生化法,定量很難,盡量采用氨基柱直接分析。氨基酸要注意的是吸收差,此外氨基柱分離時(shí)不宜采用梯度分析,不宜過(guò)酸過(guò)堿流動(dòng)相,不宜水相比例過(guò)高等。 |
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