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阿嬌金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助/交流】引物設(shè)計(jì)加堿基修飾問(wèn)題
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| 我在設(shè)計(jì)一對(duì)引物,在給定的序列兩頭分別設(shè)計(jì)上下游引物,以擴(kuò)增全部序列。由于選擇的范圍小,只能通過(guò)改變引物長(zhǎng)度來(lái)選擇引物。而所有的引物都不是很符合要求。請(qǐng)問(wèn)我可不可以在原來(lái)的基礎(chǔ)上在5'端加兩個(gè)堿基修飾,提高引物的退火溫度和引發(fā)效率??這兩個(gè)堿基是可以隨便加的嗎?隨便加ATGC都可以,還是經(jīng)過(guò)blast后找到這條序列的上游堿基,加的堿基與序列的上游堿基一致?很迷茫,望各位大俠指教!感激不盡! |
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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