 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3555 | 回復: 7 | ||
oceanworld木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
引物加保護堿基
|
|
各位大俠請問一下，我要做雙酶切，設計了一對引物加了保護堿基和酶切位點，但是卻擴增不出正確的目的片段，用沒加保護堿基和酶切位點的引物能夠擴增出正確的目的片段，請問這是怎么回事呢？下面是我設計的加了保護堿基和酶切位點的引物！謝謝各位了！ 5’ CCGCTCGAGACTTTTGGCCAGCTGCCTCT 3’ xhoI 5’ CCCAAGCTTATCATCAACAGGGAACTGTTG 3’ HindIII |
回復此樓» 猜你喜歡
085600 材料與化工 329分求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復
-
一志愿南昌大學324求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復
-
085601材料工程找調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復
-
一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷
已經(jīng)有7人回復
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復
-
化學工程085602 305分求調(diào)劑
已經(jīng)有18人回復
-
一志愿雙一流機械285分求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復
-
一志愿：西北大學，英一數(shù)一408-284分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復
-
291求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 載體構建技術請教，如何設計引物提取基因插入載體中？
已經(jīng)有3人回復
- 幫忙評價一下PCR引物
已經(jīng)有11人回復
- PCR引物設計的問題
已經(jīng)有8人回復
- 關于PCR引物設計及添加酶切位點和保護堿基的問題
已經(jīng)有4人回復
- 計算引物退火溫度時末端加的酶切位點計算在內(nèi)嗎？
已經(jīng)有5人回復
- 引物設計
已經(jīng)有4人回復
- 設計引物時酶切位點保護堿基的問題
已經(jīng)有8人回復
- 做蛋白體外表達時的引物設計問題！
已經(jīng)有12人回復
- 【求助/交流】限制性內(nèi)切酶保護堿基
已經(jīng)有20人回復
- 【求助/交流】引物設計的問題，大俠們來幫幫忙~謝謝了
已經(jīng)有7人回復
- 【專題】引入酶切位點的引物設計問題
已經(jīng)有11人回復
- 【求助/交流】求AgeⅠ(BshTⅠ)的保護堿基用什么？
已經(jīng)有4人回復
- 【求助/交流】低GC含量的模板設計引物
已經(jīng)有7人回復
- 克隆基因全長引物設計問題
已經(jīng)有32人回復
ilaveu
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 3248.9
- 帖子: 1609
- 在線: 23.8小時
- 蟲號: 260642
- 注冊: 2006-06-18
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學
2樓2012-03-30 19:16:35
oceanworld
木蟲 (小有名氣)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 2274.6
- 散金: 730
- 紅花: 1
- 帖子: 255
- 在線: 87.8小時
- 蟲號: 831030
- 注冊: 2009-08-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 發(fā)育生物學
3樓2012-03-31 08:28:49
4樓2012-03-31 19:47:58
5樓2012-04-01 01:46:34
huguangdong
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
- BioEPI: 3
- 應助: 68 (初中生)
- 金幣: 10532.4
- 散金: 858
- 紅花: 102
- 帖子: 4271
- 在線: 1581.2小時
- 蟲號: 1009663
- 注冊: 2010-05-01
- 專業(yè): 畜牧學
【答案】應助回帖
★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
oceanworld: 金幣+2, ★有幫助 2012-04-02 15:37:40
感謝參與，應助指數(shù) +1
oceanworld: 金幣+2, ★有幫助 2012-04-02 15:37:40
| 你的問題以我的經(jīng)驗絕對是做的問題，不會因為加了酶切位點和保護堿基而擴增有問題，當然你必須明白一下幾個問題：1 模板是質(zhì)粒還是基因組，如果是基因組的話有可能會出現(xiàn)擴增有誤的現(xiàn)象，但是幾率也很小。2 做一個梯度，篩選一個退火溫度，不過據(jù)我經(jīng)驗，加了酶切位點和保護堿基的引物退火溫度和不加這兩個的原始引物退火溫度相同即可。3 注意使用好的PCR相關試劑，別用便宜不穩(wěn)定的產(chǎn)品，這也很能影響擴增效果。4 注意PCR中的延伸時間設置，TAQ酶和高保真酶的延伸時間是不一樣的，根據(jù)自己目的片段長度來設置。 |
6樓2012-04-01 09:14:08
分子菜鳥
木蟲 (小有名氣)
- 應助: 18 (小學生)
- 金幣: 2261.9
- 紅花: 3
- 帖子: 136
- 在線: 345.6小時
- 蟲號: 1334847
- 注冊: 2011-06-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結構與功能
7樓2012-04-01 11:07:42
yuguiyan
至尊木蟲 (文壇精英)
- 應助: 277 (大學生)
- 金幣: 15912.3
- 散金: 451
- 紅花: 78
- 沙發(fā): 433
- 帖子: 21986
- 在線: 2078.9小時
- 蟲號: 2029722
- 注冊: 2012-09-25
- 專業(yè): 原子和分子物理
8樓2013-04-01 22:04:09
相關版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 oceanworld 的主題更新
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 375求調(diào)劑 +4 | 雨夏整夜 2026-03-29 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +6 | Amber00 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +3 | 種圣賜 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
[基金申請] 面上5B能上會嗎？ +3 | redcom 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[碩博家園] 求調(diào)劑 有機化學考研356分 +3 | Nadiums 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 356求調(diào)劑 +3 | gysy?s?a 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 330一志愿中國海洋大學 化學工程 085602 有讀博意愿 求調(diào)劑 +3 | wywy.. 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 070300化學求調(diào)劑 +4 | 起個名咋這么難 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料292調(diào)劑 +12 | 橘頌思美人 2026-03-23 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +17 | 顧九笙要謙虛 2026-03-24 | 23/1150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學大學 ，080500材料科學與工程學碩 +4 | @taotao 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中國科學院深圳先進技術研究院-光纖傳感課題組招生-中國科學院大學、深圳理工大學聯(lián)培 +5 | YangTyu1 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +6 | 生如夏花… 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 機械學碩310分，數(shù)一英一，一志愿211本科雙非找調(diào)劑信息 +3 | @357 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +4 | L when 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +7 | 加一一九 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿國科過程所081700，274求調(diào)劑 +3 | 三水研0水立方 2026-03-23 | 3/150 |
|