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keakye銅蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】質(zhì)粒的幾個問題,誘變及表達(dá)的選擇 已有2人參與
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最近做實驗,PCR產(chǎn)物連接到質(zhì)粒上做隨機(jī)誘變,選擇的是pWSK29,是個低拷貝質(zhì)粒 蛋白表達(dá),選擇的是pET21a(+),宿主菌為MG1655 我想問一下,為什么做隨機(jī)誘變選擇pWSK29? 蛋白表達(dá),為什么用pET21a(+)?聽人說好像MG1655不能用常用的表達(dá)載體,原理是什么? 另外,想問一下,復(fù)制子和啟動子強(qiáng)度如何看呢?還是常用的那幾個?比如pET21a就是T7啟動子,它的強(qiáng)度是怎么樣的? 還有,pWSK29上有個M13 primer,我想問一下,這個是什么意思? 先謝謝大家?guī)兔? |
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