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hopebiolqdhb金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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【分享】培養(yǎng)醋酸菌的培養(yǎng)基 已有6人參與
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1.醋酸菌斜面培養(yǎng)基：葡萄糖 1克，酵母膏1克，碳酸鈣1克，瓊脂2.5克，水100毫升 2.斜面培養(yǎng)斜面制作：培養(yǎng)基按配方調(diào)配好（碳酸鈣先不加入），分裝試管，滅菌備用。碳酸鈣按比例分裝、滅菌。擺斜面前將培養(yǎng)基和碳酸鈣混合，用手搓均勻，然后擺斜面，備用 3. Acetobacter Medium (醋酸菌培養(yǎng)基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (瓊脂) 15g Distilled water (蒸餾水) 1000ml Adjust (調(diào)) pH to 6.8 適用范圍：惡臭醋酸桿菌混濁變種 3．1 斜面培養(yǎng)基 葡萄糖8g，酵母粉10g碳酸鈣5g瓊脂15~20g水1000mLpH5.5，分裝試管。0.IMPa滅菌20min。95％酒精(食用級(jí))40mL。擺斜面， 3．2 液體增殖培養(yǎng)基 葡萄糖10g 酵母粉10g pH5.5水1000mL滅菌后加入酒精(食用級(jí))40mL 0.1MPa滅菌20min。 3．3 醋酸菌種的制備 擴(kuò)大培養(yǎng)過(guò)程：安瓿管，液體試管1．液體試管2，100mL三角瓶，500mL三角瓶，1000mL三角瓶，種子罐。 3．3．1 安瓿管開(kāi)啟：酒精棉球擦抹三次，用重器撞擊，打開(kāi)，注入0.5mL無(wú)菌水，將菌球溶解，全部注入裝有10mL液體培養(yǎng)基的18×180試管1內(nèi)，30℃培養(yǎng)72h，每2h搖動(dòng)—次 3．3．2 菌體生長(zhǎng)：培養(yǎng)基變混濁后，顏色變淺，對(duì)光觀察搖動(dòng)時(shí)有云霧狀金屬光澤。每只裝有10mL液體培養(yǎng)基的試管2接入lmL或0.5mL菌液，30℃培養(yǎng)48h，每2h搖動(dòng)—次。 3．3．3 三角瓶三級(jí)擴(kuò)培，三角瓶中培養(yǎng)基的裝量為50％，每級(jí)按種量在10％左右，在轉(zhuǎn)換振蕩器上恒溫培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度均為30℃，時(shí)間依次縮短為36、36、24h， 3．3．4 種子罐培養(yǎng)基同前 配料后種子罐夾套加熱滅菌100℃保持15min，冷卻后，先加入4％食用酒精，無(wú)菌操作接入菌種。接種量為10％~12％，溫度保持在30℃±1℃，通無(wú)菌空氣，菌體生長(zhǎng)時(shí)間為24~36h．視菌體生長(zhǎng)情況及鏡檢結(jié)果而定 3．3．5 每次接種前，先將菌種進(jìn)行外觀觀察 。有異樣情況者，作涂片、染色、鏡檢觀察，菌體生長(zhǎng)不正�；蛉揪娜瞧坎坏檬褂谩Ｍ庥^正常者抽檢2—3個(gè)樣品，在確保菌株純度、無(wú)污染的情況下轉(zhuǎn)入下一級(jí)菌種擴(kuò)培。培養(yǎng)醋酸菌時(shí)，需要用含糖或酵母膏（維生素B）的培養(yǎng)基，在肉湯蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)不良。大多數(shù)菌株可用六碳糖和甘油作為碳源，對(duì)甘露醇和葡萄糖酸鹽很少能利用或不能利用，不分解乳糖、糊精和淀粉。醋酸菌不形成芽孢，一般為形態(tài)近于球菌的短桿菌。醋酸菌可在PH4.3以下繁殖，增殖時(shí)多在液面成膜。幼齡細(xì)胞呈G-，老齡細(xì)胞呈可變性，因而染色只用來(lái)作為鑒定時(shí)的參考因素。醋酸菌增殖時(shí)生成揮發(fā)性酸臭。感官判斷類(lèi)似于一種丁香成分，和純醋酸的嗅感不同。防止方法不外呼改善工廠(chǎng)的環(huán)境衛(wèi)生，加強(qiáng)衛(wèi)生管理什么的。但是它也是很好控制的：1好氣性菌，盡可能降低密封容器的溶解氧（效果明顯）2.降低PH值基本無(wú)效。3.污染主要在5，6月份發(fā)生。4.與容器有關(guān)，塑料容器要比玻璃瓶容易感染，可能與塑料容器的透氧性有關(guān)。5.醋酸菌不形成芽孢，故耐熱性不強(qiáng)，65℃5~10分鐘即可殺死。所以綜合來(lái)看醋酸菌不是很難控制的。 |
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7樓2018-01-10 19:28:51
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