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niuniu2010銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】帶GST標(biāo)簽的重組蛋白的純化？ 已有11人參與
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| 將帶GST標(biāo)簽的重組蛋白進(jìn)行酶切，怎樣分離GST標(biāo)簽，目的蛋白及所用的酶切酶？能否用分子篩、跑膠等方法分離且保持目的蛋白的活性？ |
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2樓2010-09-10 16:56:10
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4樓2010-09-11 10:55:12
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5樓2010-09-11 11:00:06
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lstt09nk(金幣+2):感謝分享~ 2010-09-17 17:07:54
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用那種帶濾膜的離心管不行嗎？如果用酶切后混合物過(guò)GST標(biāo)簽柱，那酶切用的酶不是也還混在目的蛋白里嗎？但是如果用離心管的話，大于20KDa 的都可以被擋在離心管里，而你的蛋白石16左右，就可以穿過(guò)離心管的濾膜。把離心管外的濾液收集再用冷凍干燥或者再用10KDa過(guò)濾范圍的離心管再濃縮一次，計(jì)算一下濃度，就可以測(cè)活性了。 剛才看了實(shí)驗(yàn)室里的那個(gè)離心管，全名是：Amicon Ultra centrifugal filter devices. 密理博的產(chǎn)品。 [ Last edited by hugang2004_2000 on 2010-9-17 at 12:24 ] |
10樓2010-09-17 12:22:53
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