 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4895 | 回復: 2 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
pumpkin236鐵蟲 (小有名氣)
|
[交流]
【求助/交流】NIH3T3細胞培養(yǎng) 已有2人參與
|
||
|
最近老板讓養(yǎng)NIH3T3細胞，就找熟人復蘇了一瓶NIH3T3細胞，但是關于該細胞的性質不是很清楚。該熟人是用胎牛血清養(yǎng)的，而我再ATCC上看的描述是禁止用胎牛血清，最好用小牛血清。。。所以比較疑惑。。。 還有幾個問題 1消化傳代時胰酶的用量，以及消化到什么程度就可以終止消化（0.25%胰酶-0.02%EDTA） 2消化后是直接吸走胰酶直接加培養(yǎng)基吹打，然后分裝。還是吹打后還要離心，然后再加培養(yǎng)基分裝呢 3接種密度是多少？昨天我加入2ml的培養(yǎng)基吹打，然后接種了500微升到新培養(yǎng)瓶中，但是發(fā)現(xiàn)長的比較慢 3NIH3T3細胞到底什么狀態(tài)才算狀態(tài)好啊 急求各位用經(jīng)驗的高手指教下 |
回復此樓» 猜你喜歡
蛋白質檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有79人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有15人回復
-
化學工程，本211，求調劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 細胞培養(yǎng)中的問題
已經(jīng)有11人回復
- 【課件】細胞培養(yǎng)的基本條件--教你如何創(chuàng)建細胞室
已經(jīng)有102人回復
- 細胞培養(yǎng)相關問題 急�。。。�！
已經(jīng)有13人回復
- SIRNA
已經(jīng)有34人回復
- 細胞培養(yǎng)求助
已經(jīng)有5人回復
- 【求助/交流】細胞培養(yǎng)污染問題
已經(jīng)有19人回復
- 【其他】關于細胞培養(yǎng)的問題，有養(yǎng)細胞的TX們快進
已經(jīng)有14人回復
- 【求助/交流】關于細胞不貼壁的問題
已經(jīng)有5人回復
- 【分享】細胞培養(yǎng)技術個人總結1
已經(jīng)有47人回復
- 【原創(chuàng)】細胞培養(yǎng)技術自己的總結
已經(jīng)有51人回復
pumpkin236
鐵蟲 (小有名氣)
- 應助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 2.7
- 散金: 45
- 紅花: 2
- 帖子: 281
- 在線: 136.4小時
- 蟲號: 433783
- 注冊: 2007-08-18
- 專業(yè): 細胞增殖、生長與分化
3樓2010-09-18 10:20:12
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+5):好熱心啊~贊~ 2010-09-17 17:00:33
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+5):好熱心啊~贊~ 2010-09-17 17:00:33
|
你好。之所以用小牛血清，ATCC也講得很清楚，胎牛血清成分較小牛更多，有些因子會影響3T3細胞的正常生長或者引起變異。時間太久，我記得不太清楚了，你可以查一下。不過一開始我也是用胎牛養(yǎng)的，后來看了說明書就趕緊改用了。 總之我這么折騰過后也沒什么大變化，還比較正常。這個細胞挺好養(yǎng)的，跟平時養(yǎng)的貼壁細胞沒啥區(qū)別。T25的瓶，長80%-90%傳代，用gibico或者sigma的商品化胰酶0.5-1ml都可以，時間長短。鏡檢看到細胞都變圓了，就終止。不鏡檢么就在操作臺燈下觀察，輕微傾斜細胞瓶時，貼壁細胞開始有沙狀脫落就可以開始終止了。我是直接加培養(yǎng)液終止吹打的。你的胰酶配方跟我一樣，所以吹打完建議離個心，因為有EDTA。不離心也可以，就是細胞會貼壁會越來越不牢。接種密度，就一傳三沒有什么問題，長得還比較快，密度高些么長得確實快些，它也有群體效應。至于3T3細胞什么狀態(tài)算好，一是形態(tài)要對，可以跟ATCC上的圖作對比，二是看細胞消化下來是否透亮，貼壁時邊緣是否清晰，三是貼壁算不算牢，四是生長速度跟ATCC說明是否一致，這些很多都是靠經(jīng)驗，久了自然明白。如果還不能確定，那就拿個敏感藥物檢測下它的敏感性。 多養(yǎng)養(yǎng)，自然它就適應新環(huán)境了。除非本身種不好，你是從別人那里拿來的，這個很不好說，傳了多少代了，還保不保持原有的特性，對你的實驗有沒有影響，這些都是個問號。如果項目真的很重要，就去ATCC買，不要抱僥幸心理，如果沒那么講究，那就將就用吧。 |
2樓2010-09-17 12:26:22
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 070300化學求調劑 +4 | 起個名咋這么難 2026-03-27 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 【求調劑】085601材料工程專碩 | 總分272 | +4 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南師大0703化學 275求調劑 +4 | Ripcord上岸 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
[考研] 安徽大學專碩生物與醫(yī)藥專業(yè)(086000)324分，英語已過四六級，六級521，求調劑 +4 | 美味可樂雞翅 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308求調劑 +6 | 墨墨漠 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 269專碩求調劑 +10 | 金恩貝 2026-03-21 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 考研調劑 +10 | 呼呼？~+123456 2026-03-24 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 312求調劑 +9 | 上岸吧ZJY 2026-03-22 | 13/650 |
|
|
|
[考研]
 材料與化工考研調劑
+16
|
孅華 2026-03-22 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大085600，310分求調劑 +5 | 李瀟可 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 342求調劑 +3 | 加油a李zs 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 總分293求調劑 +6 | 加一一九 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 303求調劑 +6 | 藍山月 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0854人工智能方向招收調劑 +4 | 章小魚567 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學求調劑 +6 | 奶油草莓. 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 340求調劑 +5 | 話梅糖111 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調劑 +6 | 研研，接電話 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 26申博自薦 +3 | whh869393 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 285求調劑 +6 | ytter 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
一志愿東華大學控制學碩320求調劑
+3
|
Grand777 2026-03-21 | 3/150 |
|