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xuelei1987新蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助】蛋白質(zhì)測定 已有8人參與
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| 請問用緩沖溶液提取蛋白質(zhì)的時候，標準曲線空白是用緩沖液呢，還是用蒸餾水，要是想將提取液稀釋一定倍數(shù)是用蒸餾水稀釋，還是用緩沖液？現(xiàn)在對于這個問題，我很糾結(jié)，自己覺得測定標準曲線時，蒸餾水都要用緩沖溶液替換掉了！！ |
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junwen6516
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蛋白質(zhì)含量測定
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lovibond(金幣+1):鼓勵新蟲發(fā)帖 2010-10-12 10:34:45
lovibond(金幣+1):鼓勵新蟲發(fā)帖 2010-10-12 10:34:45
| 我用緩沖試劑加考馬斯亮藍測定了OD值，吸光度達到0.07，所以我覺得還是用緩沖溶液做標準曲線比較準確，可是現(xiàn)在的問題是用緩沖溶液（0.1mol檸檬酸-0.2mol磷酸氫二鈉緩沖溶液）進行測定時，溫度較低時有鹽析出，我就用水溶液配制了牛血清蛋白，用緩沖試劑做空白計算提取率時可以達到70%多，但用水做再減去緩沖試劑吸光度，提取率只達到40%，這兩種計算方法差別咋就這么大呢！再者計算不同緩沖溶液對蛋白質(zhì)提取率時，都要分開做標準曲線（用緩沖試劑做空白，標準曲線中水用緩沖試劑替代），這樣是不是具有可比性呢？不明白，自己對這個問題很迷糊��！請大家?guī)臀蚁胂朕k法�。�！ |
9樓2010-10-11 23:46:15
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