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[交流]
【求助】蛋白質測定 已有8人參與
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| 請問用緩沖溶液提取蛋白質的時候,標準曲線空白是用緩沖液呢,還是用蒸餾水,要是想將提取液稀釋一定倍數是用蒸餾水稀釋,還是用緩沖液?現在對于這個問題,我很糾結,自己覺得測定標準曲線時,蒸餾水都要用緩沖溶液替換掉了!! |
| 我用緩沖試劑加考馬斯亮藍測定了OD值,吸光度達到0.07,所以我覺得還是用緩沖溶液做標準曲線比較準確,可是現在的問題是用緩沖溶液(0.1mol檸檬酸-0.2mol磷酸氫二鈉緩沖溶液)進行測定時,溫度較低時有鹽析出,我就用水溶液配制了牛血清蛋白,用緩沖試劑做空白計算提取率時可以達到70%多,但用水做再減去緩沖試劑吸光度,提取率只達到40%,這兩種計算方法差別咋就這么大呢!再者計算不同緩沖溶液對蛋白質提取率時,都要分開做標準曲線(用緩沖試劑做空白,標準曲線中水用緩沖試劑替代),這樣是不是具有可比性呢?不明白,自己對這個問題很迷糊!請大家?guī)臀蚁胂朕k法。! |
金蟲 (小有名氣)
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