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lianyi1989金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】3'RACE求助
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| 最近在做兩條基因的RACE，一條已經(jīng)搞定，另外一條5'也已經(jīng)出來了，但是3'卻一直卡著，卡了一個月了~這個3'已經(jīng)出條帶了，但是測序總不對，有polyA和UPM，但是找不到上游引物，和原來的序列也拼接不上，重做了兩次，測序結(jié)果都是這樣...然后就重新設計引物，已經(jīng)5條了，但是就是彌散，連條帶都沒有了~ cDNA應該是沒問題的，因為另外一條基因都出結(jié)果了，用的clontech的smarter的盒子，程序和體系都是按說明說上推薦來的，也應該不會有什么問題，現(xiàn)在真不知道是哪有問題，請各位蟲友們給給意見，急死了~另外，我這3'真是做不出來的話，有沒有別方法可以得到全長？我的基因全長是1600bp左右，現(xiàn)在已經(jīng)得到了1200多了，就差3'那邊的300—400bp的了。謝謝大家啦~ |
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5樓2010-10-05 15:39:22
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