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[交流]
【求助/交流】菌落PCR為什么每次都擴(kuò)不出來呢? 已有9人參與
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我做菌落PCR,可是每次都P不出來。是因?yàn)楦锾m氏陽性菌菌壁較厚導(dǎo)致的菌體不能裂解嗎?所以體系中模板量不足? 我用1%的TRITON- X100裂解后,先對裂解上清跑了一下電泳,結(jié)果是菌體能成功裂解,但是基因組DNA不能在膠里泳動(dòng),電泳40分鐘后大部分DNA都還是在點(diǎn)樣孔里。甚至有部分向陰極泳動(dòng)。 這樣的模板能直接加入PCR體系擴(kuò)增嗎?會(huì)不會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物也是不能在膠里泳動(dòng)? |
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