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【求助/交流】熱不對稱PCR的問題，回帖就送金幣��！多謝幫忙回答的，幫頂?shù)模。? 已有12人參與
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首先，熱不對稱PCR的好處是什么？它主要用來擴(kuò)已知序列的旁側(cè)基因，然后通過 一步步提高退火溫度，最后達(dá)到P出一條帶的目的。這樣理解對嗎？ 其次，我現(xiàn)在做啟動(dòng)子的染色體步移，加了接頭后。試劑盒也是推薦用熱不對稱PCR。但這時(shí)我知道我的接頭序列，又知道我的已知序列，完全可以用普通PCR擴(kuò)嘛。這樣想對嗎？ 還有，不太理解接頭引物AP和特異性引物GSP之間在片段長度和退火上的差異。試劑盒上的：AP1:22個(gè)堿基 51度退火 AP2:19， 57度 。而建議我的GSP：25~28個(gè)堿基， 退火和GC和AP差不多。為什么堿基數(shù)差那么多？ 最后，2步法PCR（94度,64度）和3步法（94，退火，72度）有什么區(qū)別？好處是？ 大家一起來討論下這四個(gè)問題吧�。《嘀x了~~~謝謝�。。�！ 回帖就有金幣，每人可領(lǐng)5次��！ |
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