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木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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[交流] 【求助/交流】細(xì)胞核內(nèi)蛋白和細(xì)胞漿蛋白提取有什么區(qū)別？

最近要提取細(xì)胞核內(nèi)蛋白，我看網(wǎng)上基本上都是介紹細(xì)胞漿內(nèi)蛋白的提取方法，而且也是大同小異，那細(xì)胞核內(nèi)蛋白的提取方法有何講究以及需要注意的地方嗎？

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1樓 2010-11-09 09:09:38

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zhandeguo1

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蛋白

350784478(金幣+1):如果使用的裂解液和細(xì)胞質(zhì)蛋白的裂解液一樣，但是再輔以超聲波，效果是否會(huì)好很多呢？ 2010-11-09 09:20:36

裂解液的強(qiáng)度不同，細(xì)胞質(zhì)蛋白的鹽離子濃度一般150左右，裂解核時(shí)要450左右。

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2樓2010-11-09 09:14:21

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是的。蠻有經(jīng)驗(yàn)的嘛！

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3樓2010-11-10 13:18:42

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xhjggl

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上海生工有此試劑 021-37772436

細(xì)胞核蛋白/漿蛋白抽提試劑盒
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
產(chǎn)品說(shuō)明：本試劑盒用于從哺乳動(dòng)物組織和培養(yǎng)細(xì)胞中提取核蛋白和胞質(zhì)蛋白，提取制備過(guò)程簡(jiǎn)便。制備的核蛋白和胞漿蛋白能保持天然活性，并且純度較高。提取的蛋白可用于進(jìn)一步的轉(zhuǎn)錄因子活性分析、凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性測(cè)定等后續(xù)蛋白質(zhì)研究，可以每次從1×107個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞或200mg 組織中提取所需要的蛋白質(zhì)，可以使用50次。儲(chǔ)存條件：2-～8℃。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1．最大限度保持蛋白質(zhì)活性，可以用于EMSA，Pull down,Enzyme activity assay等實(shí)驗(yàn)；
2．整個(gè)操作過(guò)程只需要一個(gè)小時(shí)左右；
3．即可以用于培養(yǎng)細(xì)胞（50x107個(gè)），有可以用于動(dòng)物組織（50x200mg）蛋白質(zhì)的提取；
4．避免蛋白酶對(duì)蛋白質(zhì)的降解，保持蛋白質(zhì)的完整性和天然活性；
5．可以同時(shí)處理多個(gè)樣品。
編號(hào) 包裝價(jià)格產(chǎn)地
BSP001 50 Assays 480 生工

細(xì)胞核蛋白質(zhì)提取試劑盒
Nucleoprotein Protein Extraction Kit
產(chǎn)品說(shuō)明：本試劑盒提供獨(dú)特的組份，采用特殊的非離子型去污劑，以及焦磷酸鈉等數(shù)種蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制試劑，能夠在非變性和低滲的條件下裂解細(xì)胞，經(jīng)過(guò)洗滌去除大部分胞質(zhì)蛋白和膜蛋白，釋放的細(xì)胞核能夠保持完整，再用Lysis Buffer對(duì)細(xì)胞核蛋白質(zhì)進(jìn)行抽提的同時(shí)可以保持核蛋白質(zhì)的活性，因此該產(chǎn)品可合適用于SDS-PAGE電泳、Western Blot、免疫共沉淀，EMSA，Pull Down, 轉(zhuǎn)錄調(diào)控等后續(xù)蛋白質(zhì)或分子生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)的研究，每次可以從107個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞或200mg動(dòng)物組織提取核蛋白質(zhì)，本試劑盒可以使用50次。儲(chǔ)存條件：2-～8℃
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1．提取的核蛋白質(zhì)可以最大限度的保持蛋白質(zhì)的活性，可以用于EMSA，轉(zhuǎn)錄因子分析的實(shí)驗(yàn);
2．可以從50x107個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞或50x200mg動(dòng)物組織提取核蛋白;
3．整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程只需要45分鐘左右;
4．在提取的過(guò)程中，最大限度的減少了膜和胞質(zhì)蛋白對(duì)核蛋白的污染;
5．不需要超速度離心，可以同時(shí)處理多個(gè)樣品。
編號(hào) 包裝價(jià)格產(chǎn)地
BSP009 50 Assays 300 生工

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4樓2010-11-18 21:59:43

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zx1984

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★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

如果是單純做實(shí)驗(yàn)還是建議用試劑盒，方便，效率也比較高，最主要是節(jié)省時(shí)間。

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5樓2012-12-27 10:01:36

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