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[交流]
【求助/交流】求助，新手組培及細(xì)胞懸浮培養(yǎng)
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大家好，我是新手做組培及細(xì)胞培養(yǎng)，有幾個(gè)問題想問問大家。 1.我想問問做MS培養(yǎng)基的時(shí)候激素應(yīng)該在滅菌之前加還是之后加？要是在滅菌之后加比較好的話，應(yīng)該如何操作才能不染菌呢 2.我做的植物在懸浮細(xì)胞培養(yǎng)繼代的時(shí)候，我通常是過濾后取一定重量的細(xì)胞放入新培養(yǎng)基中，但是這種植物細(xì)胞很難過濾，很費(fèi)時(shí)間，所以經(jīng)常會(huì)染菌，我很郁悶，不知道我這么做對(duì)不對(duì)，是不是有其他的什么解決辦法。 3. 有沒有細(xì)胞懸浮培養(yǎng)方面比較好的書或者材料推薦一下，最好是實(shí)驗(yàn)方面的。不勝感激 |
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085400總分296求B區(qū)調(diào)劑求求求
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★ ★
baggio00009(金幣+1): 2011-02-16 17:24:58
baggio00009(金幣+1): 2011-02-18 02:00:21
dhd997(金幣+2): 歡迎交流 2011-02-18 10:54:02
baggio00009(金幣+1): 2011-02-22 17:59:09
baggio00009(金幣+1): 2011-02-16 17:24:58
baggio00009(金幣+1): 2011-02-18 02:00:21
dhd997(金幣+2): 歡迎交流 2011-02-18 10:54:02
baggio00009(金幣+1): 2011-02-22 17:59:09
 您好！我在研究生階段做了大量的組培工作，主要是愈傷和誘導(dǎo)的過程。 首先，對(duì)于你說的激素的問題，所有的激素，包括生長(zhǎng)素，細(xì)胞分裂素等等，都是需要0.22um的過濾器除菌過濾。然后待滅菌后的培養(yǎng)基室溫涼至45度左右，加入激素。因?yàn)榧に卦诟邷叵氯菀捉到獾摹?br /> 其次，我沒有做過細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)，你可以找一些組織培養(yǎng)教材看看。好像本科的組織培養(yǎng)教材中就有描述，或者有關(guān)組培的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)技術(shù)。 希望對(duì)你有所幫助。 |
3樓2011-02-16 16:38:15
7樓2011-02-18 15:53:20
15樓2012-05-19 00:17:30
wqj1988926
金蟲 (正式寫手)
- APEPI: 2
- 應(yīng)助: 40 (小學(xué)生)
- 金幣: 1222
- 帖子: 929
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- 蟲號(hào): 1156883
2樓2011-02-16 08:45:32
4樓2011-02-16 17:22:26
5樓2011-02-16 18:44:13
6樓2011-02-18 01:59:24
8樓2011-02-22 09:02:49
★
rainwander(金幣+1): 鼓勵(lì)積極參與交流~~~ 2011-02-24 15:31:12
rainwander(金幣+1): 鼓勵(lì)積極參與交流~~~ 2011-02-24 15:31:12
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9樓2011-02-24 14:11:49
10樓2011-02-24 15:29:22
曾經(jīng)遙遠(yuǎn)
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 2240.4
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11樓2011-02-25 10:13:10
12樓2011-03-17 22:58:51
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14樓2011-03-28 11:00:42
16樓2013-03-28 20:32:01
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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激素要在超凈工作臺(tái)里，利用0.22um的過濾器進(jìn)行除菌過濾，你可以下在外面將激素粉末溶解好，然后再在超凈工作臺(tái)里進(jìn)行過濾，需要購(gòu)買過濾器和注射器，找一個(gè)也是滅菌的離心管之類的，看你自己啦，然后用1.5mlEP管進(jìn)行分裝，保存在-20度~ 激素和抗生素都可以配置1000×的母液，就是把你的目的濃度擴(kuò)大1000倍，加的時(shí)候槍頭要用滅菌過的，按照相應(yīng)體積比例縮小加就行了~ 加激素要等到滅菌后的培養(yǎng)基室涼至不燙手，溫和的時(shí)候就差不多了，我們一般就是40度左右，激素在高溫下會(huì)降解 |
17樓2013-04-03 15:03:22
18樓2013-04-03 15:05:01
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