 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3363 | 回復(fù): 6 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[交流]
【求助】包涵體表達(dá)與可溶性表達(dá)
|
|||
| 請(qǐng)大家說一下可溶性表達(dá)比包涵體表達(dá)的優(yōu)勢(shì)有哪些？謝謝，最好全面一些哈~ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
材料專碩英一數(shù)二306
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
265求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
265求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
26調(diào)劑/材料/英一數(shù)二/總分289/已過A區(qū)線
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
281求調(diào)劑（0805）
已經(jīng)有21人回復(fù)
-
0817 化學(xué)工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章
已經(jīng)有20人回復(fù)
-
279分求調(diào)劑 一志愿211
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
085600材料與化工 求調(diào)劑
已經(jīng)有17人回復(fù)
-
能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
317求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 大腸桿菌BL21表達(dá)包涵體的問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 如何使大腸桿菌表達(dá)的時(shí)候不產(chǎn)生包涵體
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 請(qǐng)教：我的蛋白表達(dá)出來了，可溶，但為什么大部分都是沒有活性的?
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 關(guān)于重組蛋白包涵體的溶解及復(fù)性
已經(jīng)有5人回復(fù)
- pET28a載體蛋白表達(dá)為包涵體
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 原核表達(dá)和SDS-PAGE
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 融合表達(dá)蛋白酶的表達(dá)
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 蛋白表達(dá)量的提高
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 原核表達(dá)形成了包涵體怎么辦��？
已經(jīng)有22人回復(fù)
- β-糖苷酶表達(dá)可溶性蛋白很多，怎么就是沒有活性
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 求助：純化蛋白遇到包涵體了，尿素怎么用？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 可溶性蛋白和包涵體
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】組氨酸標(biāo)記的蛋白表達(dá)活性問題
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 包涵體變性復(fù)性
已經(jīng)有11人回復(fù)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
青島高校2026招生碩士研究生
+5/795
-
2026年國基求好運(yùn)！
+5/280
-
深圳技術(shù)大學(xué)集成電路與光電芯片學(xué)院郝俊杰課題組誠聘博士后、研究助理、訪問學(xué)生
+2/120
-
電力全國重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室雙一流A類長(zhǎng)江學(xué)者團(tuán)隊(duì)招2026年全日制博士1名（4月3日截止）
+2/100
-
招收材料與化學(xué)相關(guān)專業(yè)碩士研究生
+1/99
-
西北大學(xué)化學(xué)與材料科學(xué)學(xué)院博士招生（還有兩個(gè)名額，3月30日截至）
+1/64
-
飄在美國，有點(diǎn)想家
+1/53
-
西安某大學(xué)能源化工新材料研發(fā)項(xiàng)目組接收2026級(jí)調(diào)劑研究生-計(jì)算機(jī)類
+1/38
-
0854電子信息調(diào)劑，閩南師大光電芯片研發(fā)實(shí)驗(yàn)室
+1/36
-
研究生 調(diào)劑 看過來- 機(jī)械、控制工程、力學(xué)類（流體力學(xué)、一般力學(xué)等） 211 雙一流
+1/34
-
西北工業(yè)大學(xué)光子學(xué)研究團(tuán)隊(duì)誠聘博士后！
+2/32
-
【預(yù)碩】【預(yù)博】青島大學(xué)生物醫(yī)藥創(chuàng)新轉(zhuǎn)化
+1/15
-
南京醫(yī)科大學(xué)-膜蛋白結(jié)構(gòu)與功能課題組-招收2026級(jí)博士研究生
+1/10
-
河南大學(xué)龔和貴教授2026年博士研究生招生
+1/7
-
中國民航飛行學(xué)院先進(jìn)連接團(tuán)隊(duì)招收航空宇航、航空機(jī)械專業(yè)碩士研究生（學(xué)碩專碩均可）
+1/7
-
26年申博自薦-計(jì)算機(jī)視覺
+1/6
-
211/雙一流石河子大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院--電催化，CO2轉(zhuǎn)化
+1/5
-
鎮(zhèn)江托爾化學(xué)有機(jī)合成研發(fā)崗位工作機(jī)會(huì)
+1/4
-
北京高校副校長(zhǎng)團(tuán)隊(duì)招收機(jī)械類，環(huán)境類學(xué)碩和專碩
+1/2
-
重慶大學(xué)長(zhǎng)江學(xué)者團(tuán)隊(duì)誠聘儲(chǔ)能方向博士后
+1/1
5樓2014-06-12 19:35:03
★ ★
老實(shí)人sdu3375(金幣+5): 2011-03-16 19:02:38
qinhy(金幣+2): 說的很多，多給2個(gè)金幣獎(jiǎng)勵(lì)下~~歡迎常來~~ 2011-03-16 19:48:11
老實(shí)人sdu3375(金幣+5): 2011-03-16 19:02:38
qinhy(金幣+2): 說的很多，多給2個(gè)金幣獎(jiǎng)勵(lì)下~~歡迎常來~~ 2011-03-16 19:48:11
|
許多外源蛋白在大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)后都是以包涵體形式存在，包涵體是一種致密、不可溶的顆粒。一般情況下，形成包涵體表達(dá)產(chǎn)率都很高，并且容易分離得到比較純的包含體。包涵體致密的結(jié)構(gòu)有助于防止蛋白酶對(duì)它的降解作用，如果毒性較強(qiáng)的蛋白形成包涵體也就不會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生太大的損傷。如果做蛋白表達(dá)的目的是為了作為抗原制備抗體，那么出現(xiàn)包涵體也可以，可以用PBS將包涵體懸浮，使用佐劑將溶液乳化后注射進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行免疫。 包含體的形成分析原因之一在于表達(dá)量過高，表達(dá)產(chǎn)物來不及折疊為活性形式—多數(shù)以高表達(dá)見長(zhǎng)的蛋白表達(dá)系統(tǒng)都會(huì)得到包含體產(chǎn)物。如果融合蛋白表達(dá)含有標(biāo)簽，常用的做法是將包涵體用尿素溶解后在變性的情況下進(jìn)行純化，然后復(fù)性。但是，在溶解之前應(yīng)該還要確定一下，蛋白是確實(shí)不可溶還是細(xì)胞裂解不完全。利用相差顯微鏡或者染色后對(duì)細(xì)胞裂解物進(jìn)行觀察，如果仍可以看到完整的細(xì)胞或者裂解后的沉淀和之前收集細(xì)胞沉淀大小相似，則可能意味著細(xì)胞沒有被徹底裂解而導(dǎo)致檢測(cè)不到產(chǎn)物。如果形成了包涵體，在比較高倍的（>400×）光鏡下可以觀察到大腸桿菌中有致密的結(jié)構(gòu)。因?yàn)榘w可能會(huì)占據(jù)細(xì)胞一半體積。 如果希望得到能行使功能的蛋白，蛋白應(yīng)該以可溶形式表達(dá)。避免包涵體形成的方法很多，比如：選用表達(dá)量不高的蛋白表達(dá)系統(tǒng)，選擇有助于可溶性表達(dá)的融合蛋白表達(dá)系統(tǒng)等，使用基本培養(yǎng)基等也有助于可溶性表達(dá)。另外一個(gè)容易忽視的問題是大腸桿菌內(nèi)還原性過高會(huì)導(dǎo)致二硫鍵不能正確形成，同樣容易導(dǎo)致表達(dá)產(chǎn)物不溶，更換菌株有助于解決這個(gè)問題。 |
2樓2011-03-16 09:44:33
3樓2011-03-16 09:45:58
4樓2011-03-16 19:03:01
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0817 化學(xué)工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +20 | rare12345 2026-03-18 | 20/1000 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | 曼殊2266 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +5 | 想上學(xué)吖吖 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿]
申請(qǐng)回稿延期一個(gè)月，編輯同意了。但系統(tǒng)上的時(shí)間沒變，給編輯又寫郵件了，沒回復(fù)
10+3
|
wangf9518 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
[考研] 一志愿中國海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學(xué)材料求調(diào)劑，總分315（英一） +3 | sbdksD 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑招人�。�！ +3 | 山海天嵐 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 ，六級(jí)已過，有科研經(jīng)歷 +12 | 曦熙兮 2026-03-15 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | 18889395102 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 +5 | 安全上岸！ 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 總分331 +3 | ZY-05 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | Zz版 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 26申博 +4 | 八6八68 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩274一志愿211求調(diào)劑 +6 | 薛云鵬 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0854控制工程 359求調(diào)劑 可跨專業(yè) +3 | 626776879 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)]
今年的國基金是打分制嗎？
50+3
|
zhanghaozhu 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +3 | 劉夢(mèng)微 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 22408總分284求調(diào)劑 +3 | InAspic 2026-03-13 | 3/150 |
|