 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3353 | 回復(fù): 6 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[交流]
【求助】包涵體表達(dá)與可溶性表達(dá)
|
|||
| 請大家說一下可溶性表達(dá)比包涵體表達(dá)的優(yōu)勢有哪些？謝謝，最好全面一些哈~ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
293求調(diào)劑
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
0703化學(xué)336分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
304求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
281求調(diào)劑（0805）
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
環(huán)境領(lǐng)域全國重點實驗室招收博士1-2名
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料專碩306英一數(shù)二
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
301求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
302求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
26博士申請
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 大腸桿菌BL21表達(dá)包涵體的問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 如何使大腸桿菌表達(dá)的時候不產(chǎn)生包涵體
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 請教：我的蛋白表達(dá)出來了，可溶，但為什么大部分都是沒有活性的?
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 關(guān)于重組蛋白包涵體的溶解及復(fù)性
已經(jīng)有5人回復(fù)
- pET28a載體蛋白表達(dá)為包涵體
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 原核表達(dá)和SDS-PAGE
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 融合表達(dá)蛋白酶的表達(dá)
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 蛋白表達(dá)量的提高
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 原核表達(dá)形成了包涵體怎么辦啊？
已經(jīng)有22人回復(fù)
- β-糖苷酶表達(dá)可溶性蛋白很多，怎么就是沒有活性
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 求助：純化蛋白遇到包涵體了，尿素怎么用？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 可溶性蛋白和包涵體
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】組氨酸標(biāo)記的蛋白表達(dá)活性問題
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 包涵體變性復(fù)性
已經(jīng)有11人回復(fù)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
南京大學(xué)智能驅(qū)動與感知材料實驗室誠招博士/碩士/科研助理/訪問學(xué)生
+1/280
-
溫州大學(xué)呂晶晶課題組2026年招生
+1/84
-
南京理工大學(xué)優(yōu)青團(tuán)隊招聘副教授、博士后、博士、碩士生（化學(xué)、催化方向）
+1/37
-
紡織科學(xué)與工程、材料化工方向招收研究生
+1/28
-
醫(yī)學(xué)327分專碩調(diào)劑
+1/16
-
南京林業(yè)大學(xué)-國家級青年人才團(tuán)隊 招2026級申請考核制博士（合成化學(xué)、植物化學(xué)方向）
+1/14
-
河南大學(xué)龔和貴教授2026年博士研究生招生
+1/13
-
【2026博士招生/博后招聘】北京航空航天大學(xué)潘彪課題組——AI芯片設(shè)計方向
+1/11
-
重慶大學(xué)誠招2026年生物材料方向博士生
+1/8
-
南京林業(yè)大學(xué)有機(jī)功能分子實驗室博士生招生啟事
+1/8
-
博士后招聘（高薪40萬+）
+1/7
-
聊城大學(xué)化院青椒招收化學(xué)相關(guān)專業(yè)調(diào)劑學(xué)生
+1/7
-
青島科技大學(xué)可持續(xù)高分子團(tuán)隊 考研招生
+1/7
-
華中科技大學(xué)管理學(xué)院招聘社會用工（科研助理）1名
+1/6
-
福建師范大學(xué)海峽柔性電子學(xué)院招收2026調(diào)劑碩士
+1/6
-
北京高校副校長團(tuán)隊招收機(jī)械類，環(huán)境類學(xué)碩和專碩
+1/6
-
上海第二工業(yè)大學(xué)-朱大海課題組招生（過線就能調(diào)劑）
+1/5
-
課題組招收環(huán)境及相關(guān)專業(yè)調(diào)劑碩士研究生（歡迎優(yōu)秀學(xué)生加入）
+1/2
-
125603工業(yè)工程與管理調(diào)劑
+1/2
-
085400總分296求B區(qū)調(diào)劑求求求
+1/1
7樓2016-03-07 13:57:17
★ ★
老實人sdu3375(金幣+5): 2011-03-16 19:02:38
qinhy(金幣+2): 說的很多，多給2個金幣獎勵下~~歡迎常來~~ 2011-03-16 19:48:11
老實人sdu3375(金幣+5): 2011-03-16 19:02:38
qinhy(金幣+2): 說的很多，多給2個金幣獎勵下~~歡迎常來~~ 2011-03-16 19:48:11
|
許多外源蛋白在大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)后都是以包涵體形式存在，包涵體是一種致密、不可溶的顆粒。一般情況下，形成包涵體表達(dá)產(chǎn)率都很高，并且容易分離得到比較純的包含體。包涵體致密的結(jié)構(gòu)有助于防止蛋白酶對它的降解作用，如果毒性較強(qiáng)的蛋白形成包涵體也就不會對細(xì)胞產(chǎn)生太大的損傷。如果做蛋白表達(dá)的目的是為了作為抗原制備抗體，那么出現(xiàn)包涵體也可以，可以用PBS將包涵體懸浮，使用佐劑將溶液乳化后注射進(jìn)入動物體內(nèi)進(jìn)行免疫。 包含體的形成分析原因之一在于表達(dá)量過高，表達(dá)產(chǎn)物來不及折疊為活性形式—多數(shù)以高表達(dá)見長的蛋白表達(dá)系統(tǒng)都會得到包含體產(chǎn)物。如果融合蛋白表達(dá)含有標(biāo)簽，常用的做法是將包涵體用尿素溶解后在變性的情況下進(jìn)行純化，然后復(fù)性。但是，在溶解之前應(yīng)該還要確定一下，蛋白是確實不可溶還是細(xì)胞裂解不完全。利用相差顯微鏡或者染色后對細(xì)胞裂解物進(jìn)行觀察，如果仍可以看到完整的細(xì)胞或者裂解后的沉淀和之前收集細(xì)胞沉淀大小相似，則可能意味著細(xì)胞沒有被徹底裂解而導(dǎo)致檢測不到產(chǎn)物。如果形成了包涵體，在比較高倍的（>400×）光鏡下可以觀察到大腸桿菌中有致密的結(jié)構(gòu)。因為包涵體可能會占據(jù)細(xì)胞一半體積。 如果希望得到能行使功能的蛋白，蛋白應(yīng)該以可溶形式表達(dá)。避免包涵體形成的方法很多，比如：選用表達(dá)量不高的蛋白表達(dá)系統(tǒng)，選擇有助于可溶性表達(dá)的融合蛋白表達(dá)系統(tǒng)等，使用基本培養(yǎng)基等也有助于可溶性表達(dá)。另外一個容易忽視的問題是大腸桿菌內(nèi)還原性過高會導(dǎo)致二硫鍵不能正確形成，同樣容易導(dǎo)致表達(dá)產(chǎn)物不溶，更換菌株有助于解決這個問題。 |
2樓2011-03-16 09:44:33
3樓2011-03-16 09:45:58
4樓2011-03-16 19:03:01
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料，紡織，生物（0856、0710），化學(xué)招生啦 +3 | Eember. 2026-03-17 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與健康學(xué)院-課題組招收2026級食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 藥學(xué)383 求調(diào)劑 +3 | 藥學(xué)chy 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
[基金申請]
今年的國基金是打分制嗎？
50+3
|
zhanghaozhu 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +5 | 26研0 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 求調(diào)劑 +13 | enenenhui 2026-03-13 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 0703 物理化學(xué)調(diào)劑 +3 | 我可以上岸的對?/a> 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 290分有科研經(jīng)歷，論文在投 +7 | 膩膩gk 2026-03-14 | 7/350 |
|
|
|
[教師之家] 焦慮 +7 | 水冰月月野兔 2026-03-13 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0703，333分求調(diào)劑 一志愿鄭州大學(xué)-物理化學(xué) +3 | 李魔女斗篷 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑（材料與化工327） +4 | 愛吃香菜啦 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 +5 | 隔壁陳先生 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +3 | miaodesi 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工085600調(diào)劑求老師收留 +9 | jiaanl 2026-03-11 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料專碩350 求調(diào)劑 +4 | 王金科 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 工科278分求調(diào)劑 +5 | 周慢熱啊 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 是Lupa啊 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學(xué)學(xué)碩310找調(diào)劑 +3 | d如愿上岸 2026-03-13 | 3/150 |
|