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【求助/交流】土壤真菌PCR 已有6人參與
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| 最近再批土壤真菌,沒條帶,望大家提提建議,用的引物是NS1F和NS8R |
金蟲 (小有名氣)


至尊木蟲 (知名作家)
金蟲 (正式寫手)

金蟲 (小有名氣)

木蟲 (正式寫手)
金蟲 (正式寫手)

木蟲 (正式寫手)
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我也提了好幾次,效果總是不好,有時根本提不出來。 想請教下細節(jié)方面,希望指點: 1、加氯仿異戊醇后混勻是渦旋還是輕輕顛倒混勻,渦旋會使DNA斷裂嗎?離心速度和時間是多少? 2、70%乙醇洗沉淀如何進行?是直接加到沉淀中后馬上就倒掉,還是加了之后輕輕混合然后離心再吸走上清液,離心速度及時間是多少? 3、洗沉淀后一般如何干燥?發(fā)現(xiàn)我的樣經(jīng)常風干10多分鐘也沒見干,請問你是怎么做的呢? 4、用TE或者ddH2O溶解DNA的問題:是直接加進去放置一會就行了,還是要50度左右水浴下呢?還是4度放置過夜之類的? O(∩_∩)O謝謝 |
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