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laoyisng1122鐵蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助】樣品出峰時(shí)間大概在30多分鐘。但是基線漂移很嚴(yán)重？ 已有7人參與
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| 在用HPLC-UV分析 isospinosin,,, spinosin 。首先，這兩個(gè)化合物是7位和8位的取代基位置互換，其他都一樣。在甲醇-水流動(dòng)相中能分離開(kāi)，洗脫梯度為70%aq-0；時(shí)間為 0-60min，出峰時(shí)間大概在30多分鐘。但是基線漂移很嚴(yán)重。換乙腈-水后，怎么也分不開(kāi)。怎么辦？？？ |
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2樓2011-03-28 09:59:26
luojin7653
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3樓2011-03-28 10:23:23
xiaodu2007693
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4樓2011-03-28 12:11:07
5樓2011-03-28 17:24:21
laoyisng1122
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首先很感謝朋友的積極建議。 由于我的樣品至少需要檢測(cè)5個(gè)峰以上，所以，檢測(cè)范圍比較寬。用70％水：30甲醇－0％水：100％甲醇，時(shí)間：0－60min。大概10min左右出的第一個(gè)峰是需要的，然后20min左右是第二個(gè)峰。接著就是30min多分鐘出現(xiàn)好多峰，有很嚴(yán)重重疊，其中isospinosin ,spinosin就是在這里，但是分開(kāi)了。然后50多分鐘出現(xiàn)的jujubosideA也是需要的。所以，樣品中需要測(cè)的化合物極性好像差別比較大。 基線漂移，我估計(jì)是因?yàn)樘荻缺容^陡。所以換成乙腈和水系統(tǒng)。 為了摸索isospinosin ,spinosin 分離的條件，就這兩個(gè)化合物進(jìn)樣，梯度范圍為25％乙腈－50％乙腈，0-30min, 出峰 時(shí)間24min左右，分離度0.5， 不能完全分離， 于是降低乙腈濃度，為20％乙腈－50％乙腈，時(shí)間不變，結(jié)果分離度差不多。出峰時(shí)間延長(zhǎng)接近30min. |
6樓2011-04-01 19:54:39
laoyisng1122
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首先很感謝朋友的積極建議。 由于我的樣品至少需要檢測(cè)5個(gè)峰以上，所以，檢測(cè)范圍比較寬。用70％水：30甲醇－0％水：100％甲醇，時(shí)間：0－60min。大概10min左右出的第一個(gè)峰是需要的，然后20min左右是第二個(gè)峰。接著就是30min多分鐘出現(xiàn)好多峰，有很嚴(yán)重重疊，其中isospinosin ,spinosin就是在這里，但是分開(kāi)了。然后50多分鐘出現(xiàn)的jujubosideA也是需要的。所以，樣品中需要測(cè)的化合物極性好像差別比較大。 基線漂移，我估計(jì)是因?yàn)樘荻缺容^陡。所以換成乙腈和水系統(tǒng)。 為了摸索isospinosin ,spinosin 分離的條件，就這兩個(gè)化合物進(jìn)樣，梯度范圍為25％乙腈－50％乙腈，0-30min, 出峰 時(shí)間24min左右，分離度0.5， 不能完全分離， 于是降低乙腈濃度，為20％乙腈－50％乙腈，時(shí)間不變，結(jié)果分離度差不多。出峰時(shí)間延長(zhǎng)接近30min. |
7樓2011-04-01 19:54:48
laoyisng1122
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8樓2011-04-01 19:54:56
laoyisng1122
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9樓2011-04-01 19:55:13
10樓2011-04-02 10:35:01
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