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[交流]
【求助/交流】引物特異性PCR（SSP-PCR）檢測SNP，是不是容易出現(xiàn)雜帶呀 已有6人參與
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用引物特異性PCR檢測單點突變，下游引物一樣，上游引物只差一個堿基。分別在兩個體系（體系1和體系2）中進行PCR，我覺得結(jié)果應該是純合子只有在體系1或體系2二者之一中有條帶，雜合子兩個體系都有帶，且為同樣亮度的。 但為什么我的結(jié)果總會是在一個體系中有清晰條帶，另一體系中也有模糊條帶。是不是這種方法容易出現(xiàn)這種情況，可不可以認為只要不是同等亮度的都可判斷為純合型？ 請各位大俠指教！非常感謝！ |
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9樓2011-04-08 19:14:09
你跟我做的好像啊。。�！跋掠我镆粯樱嫌我镏徊钜粋�堿基”。我在兩個體系中也遇到過這樣的問題，你可以提高退火溫度或加DMSO看看，可能有些是非特異性條帶。。。我原先以為做這個特異性很難保證，但現(xiàn)在看來特異性還是可以的，沒有遇到什么非特異性條帶（我現(xiàn)在已經(jīng)合成一個體系了）
2樓2011-04-08 10:19:16
3樓2011-04-08 10:30:55
4樓2011-04-08 12:05:12
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