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[交流] 【求助/交流】配制酪蛋白培養(yǎng)基干酪素不溶解

求助各位，我將干酪素加在營(yíng)養(yǎng)瓊脂里面有大量沉淀。出現(xiàn)這種現(xiàn)象可以倒平板嗎？

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1樓 2011-04-08 10:50:04

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jennydersiry

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nancyyazi(金幣+1):謝謝參與
rainwander(金幣+1): 鼓勵(lì)交流�。�！ 2011-04-12 19:59:08

我也配過干酪素的溶液，加熱，攪拌各種方法都溶不了，后來發(fā)現(xiàn)溶液的ph恰好是干酪素的等電點(diǎn)，加點(diǎn)堿就化了，你把干酪素溶解到弱堿溶液里，再按比例加到培養(yǎng)基中即可

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2樓2011-04-08 11:15:18

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Originally posted by jennydersiry at 2011-04-08 11:15:18:
我也配過干酪素的溶液，加熱，攪拌各種方法都溶不了，后來發(fā)現(xiàn)溶液的ph恰好是干酪素的等電點(diǎn)，加點(diǎn)堿就化了，你把干酪素溶解到弱堿溶液里，再按比例加到培養(yǎng)基中即可

我把pH都調(diào)到8.5了還是有沉淀我倒平板的時(shí)候是搖勻了再倒還是倒上清

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3樓2011-04-08 13:44:01

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jingcao3081

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nancyyazi(金幣+1):謝謝參與

可能需要用PH計(jì)來調(diào)節(jié)酸堿值！祝你好運(yùn)！

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4樓2011-04-08 14:07:00

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Originally posted by jingcao3081 at 2011-04-08 14:07:00:
可能需要用PH計(jì)來調(diào)節(jié)酸堿值！祝你好運(yùn)！

我是用pH計(jì)來調(diào)的，可是不知道怎么回事？

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5樓2011-04-08 14:21:35

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樓主，你加熱了嗎，干酪素可以沸水浴加熱到一個(gè)小時(shí)以上，而且調(diào)節(jié)ph時(shí)是要先加堿再加水的

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6樓2011-04-08 18:43:27

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Originally posted by nancyyazi at 2011-04-08 14:21:35:
我是用pH計(jì)來調(diào)的，可是不知道怎么回事？

要加熱一個(gè)小時(shí)啊，我是加堿了，而且也加熱溶解了。如果培養(yǎng)基里面只加瓊脂和酪蛋白沉淀會(huì)少一些，往里面再加牛肉膏蛋白胨什么的沉淀就很多，我不明白這是為什么？

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7樓2011-04-12 13:37:47

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胡小喜

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我也發(fā)現(xiàn)這個(gè)問題了。我先是用堿把酪蛋白融了，可是一旦與蛋白胨葡萄糖等混合就出現(xiàn)沉淀了，滅菌之后還是很多沉淀，這個(gè)怎么辦啊！影響酪蛋白的性質(zhì)嗎？我要篩的是產(chǎn)蛋白酶細(xì)菌，求高人指點(diǎn)啊

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8樓2012-08-02 13:09:07

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nancyyazi

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1272425樓: Originally posted by 胡小喜 at 2012-08-02 13:09:07
我也發(fā)現(xiàn)這個(gè)問題了。我先是用堿把酪蛋白融了，可是一旦與蛋白胨葡萄糖等混合就出現(xiàn)沉淀了，滅菌之后還是很多沉淀，這個(gè)怎么辦��！影響酪蛋白的性質(zhì)嗎？我要篩的是產(chǎn)蛋白酶細(xì)菌，求高人指點(diǎn)啊

先把除酪蛋白外的培養(yǎng)基煮沸，然后酪蛋白加氫氧化鈉煮沸，趁熱加入到培養(yǎng)基里面。然后滅菌，滅菌完了還是會(huì)有沉淀，你不要搖動(dòng)培養(yǎng)基直接拿上清液倒平板就可以了。

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975925109

9樓2012-08-05 19:11:43

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975925109

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1272773樓: Originally posted by nancyyazi at 2012-08-05 19:11:43
先把除酪蛋白外的培養(yǎng)基煮沸，然后酪蛋白加氫氧化鈉煮沸，趁熱加入到培養(yǎng)基里面。然后滅菌，滅菌完了還是會(huì)有沉淀，你不要搖動(dòng)培養(yǎng)基直接拿上清液倒平板就可以了。...

那請(qǐng)問，在高溫高壓情況下滅菌，還有煮沸，酪蛋白不會(huì)變性嗎？這會(huì)不會(huì)影響它的性質(zhì)和功效

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11樓2012-09-06 10:03:34

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renzhao_11

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用酸水解干酪素或酶水解干酪素就可以了。全部澄清的，

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12樓2012-10-08 11:28:39

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可樂7紅茶

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9樓: Originally posted by nancyyazi at 2012-08-05 19:11:43
先把除酪蛋白外的培養(yǎng)基煮沸，然后酪蛋白加氫氧化鈉煮沸，趁熱加入到培養(yǎng)基里面。然后滅菌，滅菌完了還是會(huì)有沉淀，你不要搖動(dòng)培養(yǎng)基直接拿上清液倒平板就可以了。...

請(qǐng)問這樣不影響透明圈的觀察嗎？

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13樓2013-07-23 16:00:46

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面包西瓜樹

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我配制的干酪素平板是澄清的，但是加入上清液之后就如加入三氯乙酸一樣

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14樓2015-01-29 14:04:34

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國(guó)之偉

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請(qǐng)問你后面是用了染劑來觀察水解圈的嗎？急求。謝謝

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15樓2015-11-19 14:09:21

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cl8682535

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請(qǐng)問樓主是否找到了更好的方法？
最近我用奶粉配制培養(yǎng)基，篩選降解蛋白質(zhì)的菌株，滅菌后就有成塊的沉淀出現(xiàn)，準(zhǔn)備換干酪素試試，我應(yīng)該遇到了和樓主一樣的問題。

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16樓2016-09-01 16:16:31

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簡(jiǎn)單回復(fù)

strive12312310樓

2012-08-05 22:28 回復(fù)

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