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js_yangbin金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助】酶的提取緩沖液的問(wèn)題 已有5人參與
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最近看了一些蛋白質(zhì)提取相關(guān)的文獻(xiàn)，經(jīng)常會(huì)看到類似于下面的一些描述：取20 g西蘭花種子，用液氮研磨成粉末，加60 mL提取緩沖液(O.2 mol／L Tris—HCI緩沖液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)。攪拌均勻后用8層紗布過(guò)濾，濾液在4℃下，12000 g離心20 min，收集 上清液作為黑芥子酶租提液(摘自一篇碩士論文) 其中60 mL提取緩沖液(O.2 mol／L Tris—HCI緩沖液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)看不明白啊，這個(gè)提取液是怎么配制的�。� |
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4樓2011-04-14 11:34:37
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2樓2011-04-14 09:40:30
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silicare(金幣+5, EPI+1): 專業(yè) 2011-04-14 11:42:45
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silicare(金幣+5, EPI+1): 專業(yè) 2011-04-14 11:42:45
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問(wèn)： 其中60 mL提取緩沖液(O.2 mol／L Tris—HCI緩沖液，pH7.5，5％甘油，l mmo/L EDTA，3 mmol／L DTT，0.1mmo/L PMSF)看不明白啊，這個(gè)提取液是怎么配制的啊？ 如果你配制100ml 提取緩沖液，你知道應(yīng)該怎么計(jì)算用量 將Tris-HCl 配成1M （或者0.5M）, 調(diào)整pH7.5，滅菌備用 如果你配制100ml 提取緩沖液，你知道應(yīng)該怎么計(jì)算用量 EDTA 配成1M 或者0.1M 備 滅菌用 如果你配制100ml 提取緩沖液，你知道應(yīng)該怎么計(jì)算用量 3 mmol／L DTT， 可配成100mM的母液，分裝-20保存 如果你配制100ml 提取緩沖液，你知道應(yīng)該怎么計(jì)算用量 5％甘油，為體積比 0.1mmo/L PMSF， 可以配成母液，也可以直接計(jì)算晶體用量 |
3樓2011-04-14 11:21:43
silicare
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