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qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
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| 想對某物種某基因的表達(dá)做相對定量,想用雙標(biāo)曲線法,請問這個標(biāo)準(zhǔn)曲線如何去做?是要提取某物種RNA反轉(zhuǎn)得到cDNA后測定cDNA濃度再做不同梯度稀釋么?我實(shí)驗(yàn)室剛開始做這個,很多事情都不清楚。謝謝各位了! |
新蟲 (小有名氣)
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你好我也要做這個,也是不懂,現(xiàn)在還在理論學(xué)習(xí),不過我找到一點(diǎn)資料,可以和你分享一下,希望對你有幫助。應(yīng)用Real Time PCR進(jìn)行mRNA表達(dá)量的相對定量分析 http://www.doc88.com/p-73342721466.html |
金蟲 (正式寫手)
| 做標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的模板與你要定量的模板必須是擴(kuò)的完全相同的一段序列,并且你做標(biāo)準(zhǔn)曲線的模板必須能夠精確定量,比如幾個拷貝數(shù)要能算出來,所以標(biāo)準(zhǔn)品的制備是比較難的一件事情,一般都是做相對定量而不會做絕對定量 |

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