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muyuan鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[求助]
原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
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| 有蟲友做過PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化嗎，為什么我在轉(zhuǎn)化后加溶液終止轉(zhuǎn)染之后再離心，不見原生質(zhì)體沉淀了呢？誰能幫我分析分析原因，在做轉(zhuǎn)化之前在顯微鏡下觀察過原生質(zhì)體，得到的原生質(zhì)體蠻正常的 |
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新人小玥
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amisking(金幣+2, EPI+1): 鼓勵發(fā)帖應(yīng)助。 2011-04-19 19:49:55
amisking(金幣+2, EPI+1): 鼓勵發(fā)帖應(yīng)助。 2011-04-19 19:49:55
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不知道你做的是什么物種。 就我的經(jīng)驗而言，如果原生質(zhì)體比較小的話，就很難收集。 我有三個辦法解決： 1、加大原生質(zhì)體的量，就是加MMG溶液的時候就增加原生質(zhì)體濃度，這對轉(zhuǎn)化效率有一定的影響，要找好之間的平衡點。 2、終止反應(yīng)時加多點W5溶液，使PEG濃度更稀，原生質(zhì)體容易沉。 3、延長離心的時間，也可以稍微加點轉(zhuǎn)速，但是不要多，原生質(zhì)體容易破。 |
2樓2011-04-19 19:27:50
muyuan
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4樓2011-04-21 10:44:00
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8樓2015-05-20 17:05:33
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