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muyuan鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[求助]
原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
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| 有蟲(chóng)友做過(guò)PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化嗎,為什么我在轉(zhuǎn)化后加溶液終止轉(zhuǎn)染之后再離心,不見(jiàn)原生質(zhì)體沉淀了呢?誰(shuí)能幫我分析分析原因,在做轉(zhuǎn)化之前在顯微鏡下觀(guān)察過(guò)原生質(zhì)體,得到的原生質(zhì)體蠻正常的 |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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不知道你做的是什么物種。 就我的經(jīng)驗(yàn)而言,如果原生質(zhì)體比較小的話(huà),就很難收集。 我有三個(gè)辦法解決: 1、加大原生質(zhì)體的量,就是加MMG溶液的時(shí)候就增加原生質(zhì)體濃度,這對(duì)轉(zhuǎn)化效率有一定的影響,要找好之間的平衡點(diǎn)。 2、終止反應(yīng)時(shí)加多點(diǎn)W5溶液,使PEG濃度更稀,原生質(zhì)體容易沉。 3、延長(zhǎng)離心的時(shí)間,也可以稍微加點(diǎn)轉(zhuǎn)速,但是不要多,原生質(zhì)體容易破。 |
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
新蟲(chóng) (初入文壇)
新蟲(chóng) (初入文壇)
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