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wkl1984金蟲 (小有名氣)
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[求助]
質(zhì)粒提取中的假陽性
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| 最近做質(zhì)粒提取，從轉(zhuǎn)化后的含有Amp的平板上挑去單菌落，接種到含有AMP的YT液體培養(yǎng)液中，搖菌看到很渾濁，但是看不到別人所說的有大量的絮狀漂浮物，接著按照堿裂解法提取質(zhì)粒，結(jié)果沒有條帶，不知道為什么？是菌沒有培養(yǎng)好，還是挑去的菌落是假陽性？該怎樣做才能避免這種情況呢？ |
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yabxxh
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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wkl1984(金幣+2): 2011-04-20 10:18:18
reasonspare(金幣+1): 積極交流獎(jiǎng) 2011-04-20 11:22:25
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1.菌液渾濁即可，沒有必要出現(xiàn)什么漂浮物，那樣是搖菌過久或者該菌生長力過強(qiáng)的表現(xiàn)，抗生素可能已經(jīng)失效。 2.沒有質(zhì)粒的話，排除你試劑盒以及操作的問題，應(yīng)該是沒轉(zhuǎn)化成功，再做轉(zhuǎn)化一次效率會(huì)比較高一點(diǎn)。 3.保證感受態(tài)的效率以及目的片段的濃度是成功的關(guān)鍵 好運(yùn) |
2樓2011-04-20 09:51:08
119xu119
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3樓2011-04-20 11:16:15
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