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X—Gal IPTG藍(lán)白斑試驗(yàn)
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| 各位大俠好，做克隆時(shí)，涂菌前在平板上涂X—Gal 和IPTG，長出來的菌落呈白色和藍(lán)色。我的理解是白色是含有目的片段的菌落，藍(lán)色是不含目的片段但具有抗藥基因的菌落，不含抗藥基因的菌落則無法生存。但我查閱一些資料之后又發(fā)現(xiàn)藍(lán)色菌落可能為假陽性，我是新手，不太明白。請各位多多指教！ |
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yabxxh
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
reasonspare(金幣+2): 謝謝分享 2011-04-20 11:25:48
reasonspare(金幣+1): 摟主還有問題，你再麻煩以下。 2011-04-20 11:26:39
南海所老龔(金幣+1): 2011-04-26 09:21:49
reasonspare(金幣+2): 謝謝分享 2011-04-20 11:25:48
reasonspare(金幣+1): 摟主還有問題，你再麻煩以下。 2011-04-20 11:26:39
南海所老龔(金幣+1): 2011-04-26 09:21:49
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1.藍(lán)白斑篩選的原理我就不說了，你去查下資料 2.轉(zhuǎn)化了空載體的就是你看到的藍(lán)斑，其抗性來源于空載體；轉(zhuǎn)了重組質(zhì)粒的就是你看到的白斑，也就是我們的目的菌落。 3.菌落本身是沒有抗藥基因的，抗生素的篩選依據(jù)是根據(jù)載體來的。 4.藍(lán)色菌落是轉(zhuǎn)化了空載體的菌落，并不是我們的目的菌落，也就無所謂陽性和假陽性。倒是白斑，我們的目的菌落才是陽性，如果是白斑，但并不是我們需要的目的菌落，才稱之為假陽性。 你這幾個(gè)問題問的很好，說明你好好思考了。剛開始的時(shí)候我也是比較困惑這些。 希望以上能幫到你，好運(yùn)。 |
2樓2011-04-20 09:26:17
3樓2011-04-20 10:23:58
墨香若水
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9樓2011-04-26 16:36:03
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