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[求助]
X—Gal IPTG藍(lán)白斑試驗(yàn)
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| 各位大俠好,做克隆時,涂菌前在平板上涂X—Gal 和IPTG,長出來的菌落呈白色和藍(lán)色。我的理解是白色是含有目的片段的菌落,藍(lán)色是不含目的片段但具有抗藥基因的菌落,不含抗藥基因的菌落則無法生存。但我查閱一些資料之后又發(fā)現(xiàn)藍(lán)色菌落可能為假陽性,我是新手,不太明白。請各位多多指教! |
經(jīng)驗(yàn) |


木蟲 (正式寫手)
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1.藍(lán)白斑篩選的原理我就不說了,你去查下資料 2.轉(zhuǎn)化了空載體的就是你看到的藍(lán)斑,其抗性來源于空載體;轉(zhuǎn)了重組質(zhì)粒的就是你看到的白斑,也就是我們的目的菌落。 3.菌落本身是沒有抗藥基因的,抗生素的篩選依據(jù)是根據(jù)載體來的。 4.藍(lán)色菌落是轉(zhuǎn)化了空載體的菌落,并不是我們的目的菌落,也就無所謂陽性和假陽性。倒是白斑,我們的目的菌落才是陽性,如果是白斑,但并不是我們需要的目的菌落,才稱之為假陽性。 你這幾個問題問的很好,說明你好好思考了。剛開始的時候我也是比較困惑這些。 希望以上能幫到你,好運(yùn)。 |

木蟲 (著名寫手)
小小囧蟲

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