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lzhaowin木蟲 (小有名氣)
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16S PCR擴增的問題
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上周五做的16S PCR,擴增效果很好,而且做了連接和轉化~ 周日發(fā)現(xiàn)Taq E結冰了,重新訂了新的Taq E。 周二再重復做16S PCR的時候就發(fā)現(xiàn)沒有目的條帶,陽性對照條帶很弱。懷疑是dNTPs快用完了,有可能降解了,所以換了新的dNTPs,結果電泳檢測杯具的發(fā)現(xiàn)神馬都沒有! 后來接著重新稀釋100uM的引物母液至10uM,又換了實驗室另一種Taq E同樣是沒有條帶,陽性對照很弱。 懷疑是現(xiàn)在用的模板降解了?今天重復了上周五用的模板,結果還是悲催的沒有任何條帶?為什么呀?為什么?上周能做出來,這周就不行了! ![]() 望各路大俠賜教~ |
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