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fustar08木蟲 (小有名氣)
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[求助]
急求關(guān)于幾丁質(zhì)酶酶譜的問題
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幾丁質(zhì)酶譜方法：幾丁質(zhì)酶酶譜分析采用熒光法參照Trudel和Asselin的方法:離膠中加入100 mg/L乙二醇幾丁質(zhì),將電泳完的分離膠用100 mmol/L的乙酸鈉溶液(pH 5.0)配成 的10 ml/L Triton X-100復(fù)性24 h,再用50 mmol/L Tris-HCl緩沖液(pH 8.9)配制的100 mg/L熒光增白劑28熒光染料染色5 min,再用蒸餾水洗1 h,然后將分離膠放置在紫外燈下觀察,幾丁質(zhì)酶帶顯示出一條暗帶。 問題：1.剛開始幾次做酶譜是暗帶，但是后來有蛋白的地方都是亮帶，不明白原因請大蝦幫忙。 2. 乙二醇幾丁質(zhì)配置的濃度是10mg/mL，但是非常難溶，呈膠狀。是不是其分散問題使得酶譜沒有暗帶呢？但是前幾次都是同樣的操作和試劑，結(jié)果卻重復(fù)不出來，請教大家啦，衷心感謝 |
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fustar08
木蟲 (小有名氣)
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2樓2011-05-30 09:14:09
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