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wyhwawj_87新蟲 (初入文壇)
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求助 原核表達(dá)WB 多條帶 已有5人參與
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我用的是PET-28,在BL21中的表達(dá),IPTG 0.5mM 誘導(dǎo)4h,菌體制樣SDS-PAGE和WB,page膠考染沒有差異條帶,WB檢測時(shí)卻有多條帶,并且比預(yù)計(jì)大(20kd》10kd) 我換過載體和表達(dá)菌株都出現(xiàn)了這個(gè)問題!請問大俠們是什么問題啊??。。 自己分析:我的片段含有多對二硫鍵,80個(gè)aa中含有24個(gè)CYS ,是否可能是二硫鍵太多形成了多聚體,多聚體之間又因?yàn)槎蜴I的斷裂而形成大小不一的單體??? |

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