 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2333 | 回復(fù): 11 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
wyhwawj_87新蟲 (初入文壇)
|
[交流]
求助 原核表達(dá)WB 多條帶 已有5人參與
|
||
|
我用的是PET-28，在BL21中的表達(dá)，IPTG 0.5mM 誘導(dǎo)4h，菌體制樣SDS-PAGE和WB,page膠考染沒(méi)有差異條帶，WB檢測(cè)時(shí)卻有多條帶，并且比預(yù)計(jì)大（20kd》10kd） 我換過(guò)載體和表達(dá)菌株都出現(xiàn)了這個(gè)問(wèn)題�。≌�(qǐng)問(wèn)大俠們是什么問(wèn)題��？？�。�！ 自己分析：我的片段含有多對(duì)二硫鍵，80個(gè)aa中含有24個(gè)CYS ,是否可能是二硫鍵太多形成了多聚體，多聚體之間又因?yàn)槎蜴I的斷裂而形成大小不一的單體？？？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有191人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 弱弱的問(wèn)一句：原核表達(dá) &Western blot
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助】真核基因在原核生物表達(dá)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)，預(yù)測(cè)的信號(hào)肽序列是否包括
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助】 關(guān)于原核表達(dá)【有效日期截止：2011年2月28日】
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】酵母表達(dá)和原核表達(dá)，在技術(shù)上有什么不同？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)羊基因，cDNA長(zhǎng)度約為3kb，基因?yàn)橐环N有活性的酶
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)蛋白分子量偏大
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)去載體序列被翻譯后該如何去掉
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
- 【求助/交流】原核pET系統(tǒng)低溫誘導(dǎo)表達(dá)菌體濃度太小怎么辦？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)載體pGEX-4T-1對(duì)應(yīng)的表達(dá)菌株
已經(jīng)有6人回復(fù)
- [求助]原核表達(dá)如何減少包涵體
已經(jīng)有23人回復(fù)
4樓2011-05-03 20:48:25
xuguanghai
木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 2841.2
- 散金: 2764
- 紅花: 16
- 沙發(fā): 42
- 帖子: 3072
- 在線: 296.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 449061
- 注冊(cè): 2007-11-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 有機(jī)合成
2樓2011-05-03 14:48:18
elvias
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 18
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 貴賓: 0.005
- 金幣: 5850.5
- 紅花: 7
- 帖子: 389
- 在線: 91.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 302177
- 注冊(cè): 2006-12-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤免疫
3樓2011-05-03 15:12:41
lstt09nk
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
小堂
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 貴賓: 1.661
- 金幣: 8785.9
- 散金: 1465
- 紅花: 18
- 沙發(fā): 18
- 帖子: 3563
- 在線: 456.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 819954
- 注冊(cè): 2009-08-01
- 性別: MM
- 專業(yè): 陪堂主嘮嗑
★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
西瓜(金幣+4): 鼓勵(lì)交流 2011-05-04 00:48:23
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
西瓜(金幣+4): 鼓勵(lì)交流 2011-05-04 00:48:23
|
你確定你的載體，你的序列沒(méi)問(wèn)題嗎？ 你的載體上沒(méi)有連接了除了你的目的基因外的其他片段嗎？ 我們實(shí)驗(yàn)室曾出過(guò)這樣的問(wèn)題，自己的載體上海連接了其他的片段，結(jié)果表達(dá)出來(lái)的東西肯定是要大的啊，這種細(xì)節(jié)的東西千萬(wàn)不能忽略~~ 基因上沒(méi)問(wèn)題，再來(lái)考慮表達(dá)和操作的問(wèn)題 你的抗體是單克隆抗體嗎？ |
5樓2011-05-03 23:19:50
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿山東大學(xué)藥學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | 開(kāi)開(kāi)心心沒(méi)煩惱 2026-03-23 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 十三加油 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料專碩找調(diào)劑 +3 | 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 335分 | 材料與化工專碩 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷 +4 | cccchenso 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +4 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京理工大學(xué)085701資源與環(huán)境302分求調(diào)劑 +5 | 葵梓衛(wèi)隊(duì) 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 070300，一志愿北航320求調(diào)劑 +3 | Jerry0216 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿西安交通大學(xué)材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑 +11 | 楓橋ZL 2026-03-18 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +6 | 金恩貝 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 資源與環(huán)境 調(diào)劑申請(qǐng)(333分) +5 | holy J 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0805 316求調(diào)劑 +3 | 大雪深藏 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0805材料320求調(diào)劑 +3 | 深海物語(yǔ) 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +12 | 梁梁校校 2026-03-19 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +4 | Stella_Yao 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿西安交通大學(xué) 學(xué)碩 354求調(diào)劑211或者雙一流 +3 | 我想要讀研究生 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑 +11 | Ymlll 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 【同濟(jì)軟件】軟件（085405）考研求調(diào)劑 +3 | 2026eternal 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|