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SuperJerry6金蟲 (小有名氣)
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[求助]
sds-page電泳測(cè)定
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詢問下基本的操作步驟細(xì)節(jié) [ Last edited by lovibond on 2011-6-29 at 08:25 ] |

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SDS-PAGE電泳 SDS-PAGE電泳:電泳的制備和電泳條件參照汪家政[5]等的方法,分離膠濃度為12%(29.2:0.8的Acr:Bis, 375mMTrisbase, 0.1%SDS,pH=8.8),濃縮膠濃度為5%(29.2:0.8的Acr:Bis,125mMTrisbase,0.1% SDS,pH=6.8),樣品緩沖溶液(60mM Trisbase, pH=6.8,25%的甘油,14.4mol/L MCE, 2%SDS, 0.1%wt/vol的溴酚藍(lán))與樣品混合比例為5:1,電泳緩沖溶液(25mM Trisbase, 0.05%MCE, 192mM甘氨酸, 0.1% SDS, pH=8.3),電泳條件:80V出濃縮膠后電壓調(diào)到120V。電泳結(jié)束后將凝膠取下進(jìn)行染色,染色劑為考馬斯亮藍(lán)R-250(考馬斯亮藍(lán)0.1%、甲醇45%、冰醋酸10%),45min后進(jìn)行脫色(脫色劑:20%甲醇、7%冰醋酸)2h,凝膠成像儀成像。 |

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