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星雨001鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
激光掃描共聚焦顯微技術(shù):原理;標(biāo)本制備和圖像采集;應(yīng)用,方面的論文
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| 求助各位蟲(chóng)友關(guān)于激光掃描共聚焦顯微技術(shù):原理;標(biāo)本制備和圖像采集;應(yīng)用的論文 |
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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激光共聚焦顯微鏡的主要原理是利用激光掃描束通過(guò)光柵針孔形成點(diǎn)光源,在熒光標(biāo)記標(biāo)本的焦平面上逐點(diǎn)掃描,采集點(diǎn)的光信號(hào)通過(guò)探測(cè)針孔到達(dá)光電倍增管(PMT),再經(jīng)過(guò)信號(hào)處理,在計(jì)算機(jī)監(jiān)視屏上形成圖像。由于激光光源的光柵針孔和探測(cè)針孔對(duì)物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于光柵針孔和探測(cè)針孔,進(jìn)行點(diǎn)掃描時(shí),掃描點(diǎn)以外的點(diǎn)不會(huì)成像,經(jīng)逐點(diǎn)掃描后才形成整個(gè)標(biāo)本的光學(xué)切片(Optic section)。 主要生物學(xué)應(yīng)用 1、組織和細(xì)胞中熒光標(biāo)記的分子和結(jié)構(gòu)的檢測(cè) 標(biāo)本制備方法主要有免疫熒光組織和細(xì)胞化學(xué)法、熒光蛋白標(biāo)記分子法、熒光細(xì)胞染料標(biāo)記法等。 2、定量或半定量測(cè)量Ca2+ 和pH等細(xì)胞內(nèi)離子濃度及變化 利用Fluo23 、Fura2等熒光探針可以測(cè)量Ca2+在活細(xì)胞內(nèi)的濃度及變化。 3、熒光光漂白及恢復(fù)技術(shù) 利用高能量激光束將細(xì)胞內(nèi)某一部分中選定靶區(qū)域的某種熒光淬滅,然后觀察鄰近相同的熒光標(biāo)記物重新擴(kuò)散入該區(qū)域的速度和方式,從而分析細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸、受體在細(xì)胞膜上的流動(dòng)和大分子組裝等細(xì)胞生物學(xué)過(guò)程。 4、長(zhǎng)時(shí)程觀察細(xì)胞遷移和生長(zhǎng) 可以用于數(shù)小時(shí)的長(zhǎng)時(shí)程定時(shí)掃描,記錄細(xì)胞遷移和生長(zhǎng)等細(xì)胞生物學(xué)現(xiàn)象。 5、其他的生物學(xué)應(yīng)用 用高能量激光束進(jìn)行細(xì)胞損傷和損毀實(shí)驗(yàn),一般要用紫外激光束進(jìn)行細(xì)胞損毀;細(xì)胞間通訊研究;光解籠鎖活化技術(shù)等。 |
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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